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肿瘤的早期诊断和治疗是提高患者生存率的关键，而与肿瘤相关的蛋白标志物的检测分析已成为癌症诊断、病情预测以及预后评估的重要手段和依据。在本论文中，提出了两种非抗体依赖的肿瘤标志蛋白电化学检测新方法。这些方法不仅克服了传统蛋白质检测的诸多缺点，实现了两种肿瘤早期标志蛋白快速、灵敏的定量检测，而且其可行性在临床样本及细胞样本中得到了验证，为肿瘤标志蛋白的临床分析检测与应用提供新的思路和可靠手段。 1、联合使用多肽和DNA检测乳腺癌早期标志物CRIP1 半胱氨酸丰富蛋白1(CRIP1)不仅是参与多种生理病理调控机制的转录因子，而且是乳腺癌不同临床分期的理想标志物。我们利用CRIP1特异性结合多肽和特异性核酸探针分别作为捕获探针和检测探针，提出了CRIP1高灵敏分析新方法。在这一新方法的设计中，检测信号的放大输出是通过金纳米颗粒负载大量信号核酸序列实现的。因此本方法对CRIP1的检测范围是1.25到10.13 ng/mL，检测下限可以达到1.25 ng/mL。使用该方法能够直接对肿瘤样本中CRIP1进行分析检测，检测结果与样本的病理分期存在良好的相关性，显示了该方法未来在临床分析诊断中的应用前景。 2、基于靶向药物分子检测恶变细胞表面标志蛋白Smo Smo蛋白参与调控肿瘤细胞的上皮-间充质转化，是新近确定的肿瘤细胞恶变标志物。Smo蛋白存在特异性的高亲和药物小分子，可以用于其定量检测。在本检测方法中，首先将肿瘤细胞样品与药物、滚环复制(RCA)引物核酸一起温浴，药物分子即可与细胞表面的Smo蛋白结合。而未与细胞结合的过量药物分子则要与RCA引物分子相竞争，最终结合到电极表面。细胞表面的Smo蛋白越多，剩余的未结合的药物分子就越少，最终电极上结合的药物分子就越少，而结合的RCA引物就越多。这样就产生了与细胞表面Smo蛋白量成正比、且经过滚环复制放大的信号输出。本方法对Smo的检测范围是0.1到3200pM。并且使用该方法可检测不同肿瘤细胞系细胞表面Smo表达的差异，并有望用于临床组织、血浆样本中肿瘤细胞Smo蛋白的检测。