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本实验采取高效液相色谱法(HPLC)对两个不同浓度的恩诺沙星注射液在猪体内的药物动力学进行了研究,以比较两种注射液的差异性。本试验过程中自行建立了猪血浆中恩诺沙星和环丙沙星的液液萃取方法,使用甲醇和冰醋酸作为萃取试剂,采用HypersiL BDS C18(4.6mm×3.0mm,5μm)色谱柱对血浆样品中的恩诺沙星和环丙沙星进行分离,以乙睛-磷酸盐缓冲液(pH=3)(15:85,v/v)作为流动相,流速1mL/min,紫外检测波长278nm,柱温25℃作为猪血浆中恩诺沙星和环丙沙星的色谱检测条件,经试验,恩诺沙星和环丙沙星的萃取绝对回收率分别高于80.70±4.18%和79.21±6.45%,恩诺沙星日内变异系数小于5.18%,日间变异系数小于6.23%,环丙沙星日内变异系数小于6.49%,日间变异系数小于8.13%,恩诺沙星和环丙沙星的血浆标准曲线线性关系好,相关系数(r)分别达到0.9995和0.9993,恩诺沙星和环丙沙星在猪血浆中的定量限均为0.05μg/mL,恩诺沙星和环丙沙星的色谱峰能够很好地与杂质色谱峰分离,使测定不受干扰,所建立的药物萃取和测定方法稳定可靠,重现性好。
将30只健康猪,随机平均分为三组,分别以2.5mg/kg体重恩诺沙星单剂量静脉注射恩诺沙星原料药、20%恩诺沙星注射液(“恩诺沙星-200”)以及2.5%恩诺沙星注射液(“海达”)。采用WinNorlin6.1药物动力学程序软件进行处理药-时数据,得出相关药物动力学参数。结果表明,恩诺沙星静脉注射给药后符合二室开放模型,肌肉注射给药符合符合一级吸收一室模型。恩诺沙星经静脉注射后,恩诺沙星的主要药动学参数为:峰浓度(Cmax)1.35μg/mL,分布半衰期(t1/2α)0.38h,消除半衰期(t1/2β)1.70h,药时曲线下面积(AUC)3.40μg.h/mL;肌肉注射的主要药动学参数分别为:峰浓度(Cmax)0.62μg/mL和0.55μg/mL,吸收半衰期(t1/2Ka)0.11h和0.14h,消除半衰期(t1/2β)3.15h和3.56h,药时曲线下面积(AUC)3.16μg.h/mL和3.28μg.h/mL。t检验表明两种制剂tmax和Ka差异极显著(P<0.01);Cmax和t1/2Ka差异显著(P<0.05);AUC和t1/2β无显著性差异(P0.05)。表明两者生物利用度都比较高,其中“恩诺沙星-200”的峰浓度比较高而消除半衰期较短,“海达”的峰浓度较低而消除半衰期比较长。