【摘 要】
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目的:确定大黄药材质量标准,对大黄多糖提取、纯化工艺进行研究,并将其制备成脂质体,对其脂质体制备进行考察,筛选最合理工艺,使大黄多糖药理作用与脂质体技术结合,充分发挥药效,并对
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目的:确定大黄药材质量标准,对大黄多糖提取、纯化工艺进行研究,并将其制备成脂质体,对其脂质体制备进行考察,筛选最合理工艺,使大黄多糖药理作用与脂质体技术结合,充分发挥药效,并对大黄多糖及其脂质体调节免疫力,抗肿瘤的作用进行实验验证。
方法:采用单因素试验法对影响大黄多糖提取的温度、固液比、提取时间、提取次数、醇沉浓度、醇用量等因素进行考察,确定大黄多糖提取最佳工艺;采用HPD-300大孔树脂对大黄多糖进行脱色试验研究;采用Sevage法除蛋白,用考马斯亮蓝法测定蛋白质含量,对三氯甲烷与正丁醇比例、药液与试剂的用量比例、萃取次数三个因素进行单因素考察,以优选除蛋白工艺;对大黄多糖脂质体制备方法及影响脂质体包封、成型因素进行研究,以包封率为指标,筛选出适宜的大黄多糖脂质体制备工艺;对大黄多糖及其脂质体对小鼠网状内皮系统吞噬功能的影响进行实验研究,考察大黄多糖及其脂质体对肠癌细胞HT29的体外作用,以验证大黄多糖抗肿瘤效果,证明其制剂的药学作用及使用意义。
结果:大黄多糖最佳提取工艺为:100℃下,10倍量水提2次,每次2h,用6倍量90%乙醇进行粗多糖分离;大黄多糖脱色素最佳工艺为:0.25g/ml生药药液,以6BV/h速度滴漏,HPD-300大孔树脂径高比为1/17;最佳除蛋白工艺为:三氯甲烷与正丁醇体积比为3:1,药液与Sevage试剂体积比为4:1,萃取分离次数为5次;采用注入法制备大黄多糖脂质体,优选工艺为胆固醇与卵磷脂质量比为4:1,加入PH6.86磷酸盐缓冲液40ml,5.6mg/g大黄多糖液10ml;药效学实验显示,大黄多糖及其脂质体能明显提高巨噬细胞吞噬指数、吞噬系数(P<0.05);体外肿瘤细胞抑制实验显示,大黄多糖及脂质体对HT-29人肠癌细胞具有明显的抑制作用(P<0.05)。
结论:大黄药材资源丰富,来源广泛,其多糖成分具有良好的调节免疫功能、抑制肿瘤细胞的作用。我们将大黄多糖制备成脂质体,使其药效得到充分发挥;试验结果显示,大黄多糖提取纯化工艺、脂质体制备工艺设计合理、可行,对其临床试验及其他新药、制剂提供了良好的理论依据。
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