抗生素的发现给人类的生产、生活带来了巨大变化。但从上世纪40年代，随着抗生素作为饲料添加剂的广泛应用，其种种弊端也逐渐被人们所认识。比如导致动物胃肠道正常菌群失调，产生耐药性和药物残留等副作用，给动物和人类的健康带来很大了危害。于是，国内外许多学者日趋关注和寻找能够克服上述弊端的抗生素替代物，益生菌的研究开发便随之引起各国的重视。 该文从市售益生菌产品中分离筛选得到乳酸菌和酵母菌的优良菌株，从微生物保藏机构购买霉菌。通过对菌株单独发酵特性和保藏条件的研究，确立各种菌株的优化增殖培养条件以及适合的保藏方法，为乳酸菌、酵母菌和霉菌在益生菌中的配伍使用提供应用依据。 实验对样品进行分离筛选，得到一株乳酸菌和酵母菌(编号为Lact.2和Y2)，经过形态学和生理生化实验，鉴定为嗜酸乳杆菌(L.acidophilus)和梨生布勒掷孢酵母(Bullerapiricola)。 对嗜酸乳杆菌(L.acidophilus)、梨生布勒掷孢酵母(Bullerapiricola)和米曲霉As3.800的发酵特性进行研究，确立了生长的最佳培养基、pH、温度。嗜酸乳杆菌(L.acidophilus)的培养条件为：蔗糖2％，酵母膏0.5％，大豆蛋白冻0.5％，柠檬酸三铵0.2％，吐温800.1％，K2HPO40.2％，CH3COONa0.5％，MnSO4·4H2O0.025％，MgSO4·7H2O0.058％，pH6.00，35℃；梨生布勒掷孢酵母(Bullerapiricola)为：葡萄糖1％，酵母膏0.3％，大豆蛋白胨0.5％，麦芽汁0.3％，pH5.50，30℃，150r.min-1；米曲霉As3.800为：可溶性淀粉3％，酵母膏0.3％，NaCl0.05％，MgSO4·7H2O0.05％，FeSO40.001％，K2HPO40.1％，pH6.00，30℃，150r.min～。在此培养条件下，乳酸菌活菌数为9.0×109CFU.mL-1，酵母菌活菌数为2.0×109CFU.mL-1，霉菌生物量为19.22mg.mL-1。 对嗜酸乳杆菌(L.acidophilus)、梨生布勒掷孢酵母(Bullerapiricola)和米曲霉As3.800代谢产物对菌体生长的影响进行了研究，在实验条件下，代谢产物基本不影响菌体的生长；对三种菌进行了共培养的初步研究，在厌氧条件下，乳酸菌生物量较高，酵母菌和霉菌生物量较低。鉴于益生菌应用中，乳酸菌的功效占主导地位，酵母菌和霉菌起辅助营养作用，因此，乳酸菌、酵母菌和霉菌的复配使用基本可行。 对乳酸菌和酵母菌进行了液态保藏的研究发现，低pH值环境加快菌体的消亡，中性pH值更适合菌体的存活；冻干保藏的研究表明，10％蔗糖溶液对嗜酸乳杆菌(L.acidophilus)的冻干保护效果最好，10％可溶性淀粉对梨生布勒掷孢酵母(Bullrapiricola)的冻干保护效果最好；一定浓度范围内，保护剂浓度的升高会增加对菌体细胞膜的保护面积，保护效果也随之增加。 通过分离出优良菌株，进行高密度培养，寻找有效的保藏方法，是微生态制剂产业的主要思路和技术关键点。该文对嗜酸乳杆菌(L.acidophilus)、梨生布勒掷孢酵母(Bullerapiricola)和米曲霉As3.800作为微生态制剂配伍菌进行的基础性研究结果，能够为乳酸菌、酵母和霉菌在生产上应用提供理论依据。