油菜菌核病菌(Sclerotinia sclerotiorum)营养生理初步研究

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油菜菌核病是我国油菜上主要病害。为了明确其病原菌——核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)的营养生理,从而为核盘菌的相关研究及油菜菌核病的“营养疗法”提供试验依据,本学位论文研究了碳氮源营养及B、Zn、Se等微量元素对油菜菌核病菌(核盘菌)生长速率及菌核产生量的影响,取得的主要结果如下:  1不同培养基对核盘菌生长速率及菌核产生量的影响  以采自安徽油菜上的12个核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)菌株为供试菌株,测定了PDA、PSA、胡萝卜培养基、燕麦培养基、甘薯培养基等5种培养基对核盘菌生长速率及菌核产生量的影响,供试菌株在5种培养基上培养2d后测量菌丝直径,7d、14d、30d记录菌核数目。实验结果表明,大多数油菜菌核病菌菌株的菌丝生长以在PSA培养基上最好,菌核形成数量也以在PSA培养基上最多;也即PSA培养基对于大多数核盘菌菌株的菌丝生长和菌核形成是最佳的。  2不同碳氮源营养对核盘菌生长速率及菌核产生量的影响  以查式培养基为基础,分别以供试碳源、氮源代替培养基中的蔗糖、硝酸钠配制成不同碳氮源培养基,将供试的12个核盘菌菌株接种到上述不同碳氮源培养基上,置25℃黑暗培养。2d后测量菌落直径,第7、14、30d时记录菌核数目,测定分析不同碳氮源营养对核盘菌生长速率及菌核产生量的影响。实验结果表明,对于核盘菌菌丝生长和菌核形成而言,最佳碳源为蔗糖,最佳氮源是蛋白胨。  3硼元素对核盘菌生长速率及菌核产生量的影响  在熔化的PDA培养基中加入硼酸钾(K2B4O7.5H2O),配制成硼酸钾含量分别为0.01,0.05,0.10,0.5,1,2,4,8,16mg/L的PDA培养基,将供试的12个核盘菌菌株接种到上述不同含硼培养基上,置25℃黑暗培养,以不加硼酸钾的PDA培养基为对照。接种2d后测量菌落直径,第7、14、30d时记录菌核数目。测定结果表明,硼在低浓度(0.01mg/L、0.05mg/L)时,对菌丝生长有促进作用;而在较高浓度(0.5mg/L~16mg/L)时,对菌丝生长有抑制作用,且随着硼元素浓度增高,对菌丝的抑制作用就越明显。硼在一定浓度下对油菜菌核病菌菌核产生量有抑制作用,在硼离子浓度为2mg/L~16mg/L时,随着浓度的增加,菌核产生量抑制率增加。  4锌元素对核盘菌生长速率及菌核产生量的影响  测定方法同上,只是用硫酸锌(ZnSO4)配制成不同浓度的含锌培养基。实验结果表明,当锌离子的浓度为0.01~4.00mg/L时,对核盘菌菌丝生长总体有明显促进作用。当锌离子的浓度为0.01~4.00mg/L时,各浓度处理对核盘菌菌核产生量率均低于空白对照,说明锌对核盘菌菌核产生量有明显抑制作用。  5硒元素对核盘菌生长速率及菌核产生量的影响  在熔化的PDA培养基中加入亚硒酸钠(Na2SeO3)配制成不同含硒培养基,将供试的12个核盘菌菌株接种到上述不同含硒培养基上,置25℃黑暗培养,以不加亚硒酸钠的PDA培养基为对照。实验结果表明:加入了低浓度的亚硒酸钠(<0.01mg/L)的培养基,其核盘菌的生长与对照组进行对比,可显著看到菌丝生长浓密,有一定的促进核盘菌生长的作用,菌核生长速率较快,7d即可形成。而在培养基含硒浓度较高(10mg/L~100mg/L)时,硒对核盘菌的菌丝生长有明显抑制作用,菌丝生长稀疏,且随着浓度的升高,菌丝生长抑制率增加。此外,菌丝形态观察发现,在硒浓度>10mg/L时,核盘菌菌丝形状变化明显,与空白对照(CK)相比,菌丝较短且较粗,菌丝扭曲,呈现畸形。  此外,测定结果还表明,在试验设置的培养基含硒浓度(0.01mg/L~100mg/L)范围内,硒元素对菌核形成有明显的抑制作用,且当硒元素浓度达到>80mg/L时,菌核便不再形成。
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