【摘 要】
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解剖1000头褐飞虱5龄若虫,获取中肠部位,研磨后梯度离心得到刷状缘膜囊泡BBMV,运用噬菌体展示技术筛选与BBMV特异结合的短肽,通过PCR扩增连接短肽序列和绿色荧光蛋白GFP序列,
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解剖1000头褐飞虱5龄若虫,获取中肠部位,研磨后梯度离心得到刷状缘膜囊泡BBMV,运用噬菌体展示技术筛选与BBMV特异结合的短肽,通过PCR扩增连接短肽序列和绿色荧光蛋白GFP序列,将重组序列先后连接到克隆载体pMD18-T和表达载体pET-32a,并分别转化大肠杆菌JM109和BL21,最后用IPTG诱导表达重组序列,得到大小约45KDa的融合蛋白,利用表达载体pET-32a的组氨酸标签提纯融合蛋白。通过膜饲喂方法以融合蛋白喂食褐飞虱5龄若虫,解剖得到中肠,将中肠在PBS溶液中清洗后转移至荧光显微镜下用蓝紫光观察,结果显示融合蛋白可以结合到褐飞虱的中肠。
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