目的建立起高效液相色谱法（HPLC）来检测微透析液中左氧氟沙星的浓度,利用微透析技术研究左氧氟沙星在比格犬的前列腺和颈静脉中的药代动力学。建立起HPLC法来检测细胞中左氧氟沙星的浓度,研究药物进入人正常前列腺上皮细胞（RWPE-1）的特征。方法HPLC检测左氧氟沙星的浓度,采用Kromasil-C18色谱柱（150 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为乙腈-10 mmol/L磷酸二氢钾溶液（15:85）,柱温30℃,紫外检测波长为294 nm,进样量10μl。利用透析法、反透析法测定血管同心圆探针体外相对回收率,分析药物浓度、流速对相对回收率的影响。利用反透析法测定颈静脉、前列腺中探针的体内相对回收率,考察体内12 h的回收率稳定性。基于体内、外校正的结果,以合适的流速进行颈静脉和前列腺中的药代动力学研究。建立起HPLC法来检测细胞中左氧氟沙星的浓度,考察其线性范围、精密度、回收率以及稳定性。考察不同时间、浓度、温度以及有无P-糖蛋白抑制剂情况下,左氧氟沙星进入RWPE-1的特征。结果在0.1～50.0μg/ml浓度范围内左氧氟沙星的HPLC分析方法线性关系良好（R²=0.997）,且专属性良好,高浓度质控样品、中浓度质控样品、低浓度质控样品、定量下限的精密度、准确度等均符合分析要求。体外实验中,血管同心圆探针的正向回收率和反向回收率差异没有统计学意义（P>0.05）,药物浓度不影响体外回收率,且回收率随流速的增大回收率减小。体内实验中,颈静脉和前列腺中的探针相对回收率不随浓度的变化而变化,且相对回收率在12 h内稳定。药代动力学实验中,血液和前列腺中的药代动力学参数分别是t_1/2（4.74±1.31）和（3.75±2.64）h,C_max（24.86±3.31）和（15.48±1.56）μg/ml,T_max（0.61±0.40）和（1.06±0.96）h,AUC_0-t为（80.55±28.12）和（50.97±6.74）μg·h/ml,AUC_0-∞（115.82±41.20）和（67.77±23.16）μg·h/ml,MRT（6.61±1.49）和（5.48±3.15）h。细胞中左氧氟沙星的分析方法浓度范围为在0.05～5.0μg/ml,回归曲线方程:Y=53132X-556.13,R²=1。精密度、回收率和稳定性均符合要求。左氧氟沙星浓度4～160μg/ml范围内,摄取量开始呈增加趋势随后趋于饱和。在37℃和4℃下,前者条件下的细胞平均摄取量高于后者。P–糖蛋白抑制剂实验组与空白对照组的药物摄取量没有统计学意义（P>0.05）,但是前者的平均摄取量高于后者。结论所建立的HPLC分析方法可用于左氧氟沙星微透析探针的测定,反透析法可用于测定左氧氟沙星微透析探针的体内相对回收率。体内校正和药代动力学流速为1.5μl/min。左氧氟沙星在血中与前列腺中的分布不平衡,可能是由于存在于前列腺组织的MRP4蛋白外排转运作用影响。所建立的HPLC分析方法可用于细胞中左氧氟沙星浓度的测定,细胞摄取时间为15 min,P–糖蛋白可能参加了左氧氟沙星在RWPE-1细胞中摄取过程。