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本论文研究了生物相容性Fe3O4磁性纳米颗粒的制备及其与血浆蛋白之间的相互作用并以之为基础构建了靶向型双模态纳米分子影像探针,在肿瘤早期诊断中进行了体外和体内应用。
首先,采用“一锅法”反应制备技术,在二苯醚惰性溶剂中,利用高温热解法分解乙酰丙酮铁,制备了以油胺以及双羧基聚乙二醇稳定的超顺磁性Fe3O4纳米颗粒。此纳米颗粒具有超顺磁性、高饱和磁化强度,并具有优异的胶体稳定性。而且此纳米晶体表面带有自由的羧基功能基团,可用于进一步的生物耦联。
其次,利用等温滴定微量热法研究了不同表面性质的Fe3O4磁性纳米颗粒与血浆蛋白之间的相互作用。结果表明,Fe3O4磁性纳米颗粒与血浆蛋白之间的相互作用强烈依赖于磁性纳米颗粒的表面性质。表面电荷较强的Fe3O4磁性纳米颗粒的将同与其带相反电荷的蛋白产生强相互作用。同时,Fe3O4磁性纳米颗粒表面修饰的PEG与蛋白之间的作用主要表现为氢键相互作用,PEG分子能够有效降低Fe3O4磁性纳米颗粒与血浆蛋白之间的相互作用。而用上述方法制得的利用PEG与油胺分子共同修饰的、具有近中性表面电荷的磁性纳米颗粒能够避免与血浆蛋白的强相互作用,表现出良好的生物相容性,适于进行体内应用。
最后,将此制得的表面羧基功能化的生物相容性的Fe3O4磁性纳米颗粒与靶向性抗肿瘤抗体进行共价耦联,凝胶电泳以及动态光散射结果验证了耦联的有效性。另外,竞争结合实验结果表明耦联反应很好地保持了抗体的活性。进一步地,将抗肿瘤抗体单克隆抗胃癌抗体3H11用放射性同位素1251标记,并与Fe3O4磁性纳米颗粒耦联,成功地构建了能够对胃癌细胞进行靶向性识别的双模式分子影像探针,用于磁共振造影以及放射性成像。体内体外实验结果表明,该探针可以特异性地识别肿瘤细胞以及活体肿瘤,并在长达72小时的时间内实现了体内肿瘤灵敏的磁共振成像以及放射性成像。