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目的：双微体(Double minute chromosomes，DMs)是染色体外的遗传单位，是无端粒、无着丝粒、可自主复制的染色小体，多成对存在，是基因扩增的一种主要存在形式。研究表明，DMs与衰老、基因组不稳定、肿瘤及耐药密切相关。通过对含双微体的单细胞克隆进行体外传代培养，研究DMs数量、扩增基因的稳定性及其相关机制将有助于揭示肿瘤中癌基因的扩增、演变及基因扩增的相关机制，对于肿瘤遗传学的发展及其临床应用有着重要的意义。 方法：用有限稀释法对人卵巢癌细胞UACC-1598进行单克隆培养，传代培养后进行中期染色体制备，确定含双微体多和少的两个单细胞克隆，即Clone4/59。对两种细胞进行生长曲线测定，确定二者生长情况有无异同。SNP6.0芯片对Clone4和Clone59扩增基因进行定位，并分析其扩增水平，判断二者有无差异。通过FISH验证Clone4和Clone59中扩增基因是否存在于双微体上及其扩增情况。在连续传代过程中，制备中期核型检测两个单克隆双微体数目是否稳定。在DNA水平通过Real-time PCR测定扩增基因在Clone4和Clone59细胞中是否存在差异，并且在连续传代过程中此差异是否稳定存在。 结果：分离得到含双微体多和少的两个单细胞克隆Clone4/59。对两种细胞进行生长曲线测定，结果显示Clone4细胞生长较迅速，而同等条件下Clone59细胞生长较慢，二者差异显著。SNP6.0芯片结果显示在两种细胞克隆中，基因扩增都处于较高水平。FISH结果表明在Clone4中扩增的基因位于双微体上，而在Clone59中扩增的基因位于均质染色区。两个单细胞克隆培养到100代以上，在连续传代过程中，核型显示Clone4和Clone59细胞中双微体数目基本稳定。Real-time PCR结果显示，在DNA水平，基因扩增水平在Clone4和Clone59细胞中差异显著，并且在连续传代过程中此差异稳定。 结论：建立了含双微体不同的两个单细胞克隆Clone4/59。单细胞克隆在传代培养过程中双微体数目具有稳定性，在两种克隆中，候选基因都表现为高扩增，在连续传代中稳定存在。FISH结果验证了Clone4和Clone59中候选基因都为高扩增，但二者表现形式不同，在Clone4中扩增基因以双微体(DMs)形式扩增，而在Clone59中扩增基因以均质染色区(homogeneously staining regions，HSR)形式扩增。