本研究的主要目的是利用体外的方法探讨添加苹果酸对多不饱和脂肪酸(polyunsaturated fatty acid,PUFA)瘤胃生物氢化(biohydrogenation,BH)的影响以及苹果酸和十八碳脂肪酸对瘤胃甲烷产量的影响。研究包括两部分:1.利用持续动态人工瘤胃装置研究富含二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)日粮中添加不同水平苹果酸对瘤胃脂肪酸氢化代谢以及瘤胃发酵的影响。试验采用完全随机设计,试验处理为不添加苹果酸的对照组(CON),添加10mmol/L苹果酸的处理1(Trt 1),添加20mmol/L苹果酸的处理2(Trt 2)。连续培养7d,其中适应期6d,采样期1d。试验在两周内重复进行两次。结果表明,添加不同水平苹果酸对瘤胃液脂肪酸组成及含量、pH值和乙酸浓度无显著影响(P>0.05);但丙酸、丁酸和总挥发性脂肪酸(total volatile fatty acid,TVFA)含量显著升高(P<0.05),乙酸/丙酸比例极显著降低(P<0.01)。随着采样时间的变化各发酵参数的变化趋势基本一致,均呈现先下降后上升的变化。2.利用全自动实时产气记录装置研究添加不同饱和度的十八碳脂肪酸和不同水平苹果酸对瘤胃甲烷产量、瘤胃发酵、原虫数量以及总产气量的影响。试验选择三种水平的苹果酸(0 mmol/L,5 mmol/L-5MA,10 mmol/L-10MA)和四种饱和度不同的十八碳脂肪酸(C18:0-SA,C18:1-OA,C18:2-LA,C18:3-LNA),以及苹果酸(5MA,10MA)和脂肪酸(OA,LA和LNA)的混合物作为试验处理,不添加苹果酸和脂肪酸的空白培养瓶作为对照组。试验期为36 h,每个处理3个重复,试验在两周内重复进行两次。与不添加脂肪酸的对照组相比,除添加SA组外,其他各处理组甲烷产量显著降低,且LA处理抑制作用最强;发酵液pH值显著升高,原虫数量显著降低,总产气量显著降低。添加苹果酸使发酵液丙酸浓度显著升高,发酵液pH值降低;甲烷产量显著降低,且随着添加量的增加对甲烷的抑制作用增加。在添加苹果酸的基础上,随着脂肪酸不饱和度的增加,甲烷产量、总产气量以及原虫数量均显著降低,但是LA和LNA处理组之间差异不显著(P>0.05)。综合本研究结果,在富含DHA的日粮中添加苹果酸对发酵液中脂肪酸的组成及含量没有影响,说明添加苹果酸不会降低PUFA瘤胃BH程度;添加不饱和脂肪酸和苹果酸对瘤胃甲烷产量有显著的抑制作用,添加苹果酸改善了瘤胃的发酵。但是研究发现,添加不饱和脂肪酸对甲烷的抑制并没有随着脂肪酸不饱和度的增加而增加。说明脂肪酸不饱和度和甲烷抑制作用之间没有直接关系。