苜蓿根瘤菌(S.meliloti)nifA突变菌株的表型变化和在根瘤中引发宿主差异表达基因的筛选与功能

来源 :中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所 中国科学院上海生命科学研究院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:popelrain2009
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根瘤菌与豆科植物的共生固氮作用是一个多相级的发育过程。苜蓿中华根瘤菌(S.meliloti)nifA基因是根瘤固氮过程中的正调节因子。许多研究表明,nifA基因的突变导致宿主植物根部产生许多小的白色无效瘤。S.meliloti nifA基因的表达需要微氧条件诱导,但在有氧条件下也能微弱表达。 本研究发现,在自生条件下,nifA突变株在半固体培养基上的泳动变慢,胞外蛋白的总量也比野生型菌株低。有趣的是,在根瘤菌生长的延滞期,nifA突变株中高丝氨酸内酯(AHLs)的含量比野生型低,而在指数期和静止期,却比野生型高。同时,nifA的突变也导致了根瘤菌竞争结瘤能力的下降。 本研究室的工作证明,S.meliloti的nifA基因在共生互作过程中具有多效性,不仅对固氮有正调节作用,而且调节了根瘤的形成。 为了进一步理解nifA基因对根瘤形成的调节机制,本文运用cDNA-AFLP(cDNA-amplified fragment length po1ymorphism)技术对比分析了nifA突变株和野生型诱导的苜蓿根瘤中的基因表达的差异。在约3000个转录衍生片段(transcript-derired fragments,TDFs)中,得到了37个差异表达的TDFs。 序列分析表明,它们可能涉及信号传导,蛋白降解,细胞的发育和死亡,营养代谢等多方面的功能。在这些差异表达的TDFs中,重点研究了苜蓿植物中的一个新的膜联蛋白N-端样的基因NALP。在根部,NALP基因在维管束和分生组织中表达。过表达NALP严重影响了苜蓿植物根毛的极性生长,根毛的顶端出现丫叉状变形,它可能参与了根毛内钙离子振荡的形成。因为钙离子振荡和根毛变形是根瘤形成所必须的阶段,膜联蛋白N-端样基因NALP可能是根瘤形成过程中的一个关键基因。
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