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目的:评估重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rHuGM-CSF)对 TNBS诱导的小鼠结肠炎症损伤的预防作用,并研究其对炎症介质干扰素-γ(Inteferon-γ-IFN-γ)和白细胞介素-10(Interleukin-10,IL-10)在结肠粘膜组织中的mRNA表达的影响,从而探讨GM-CSF在Crohns病中可能的作用机制。
方法:将53只BALB/c小鼠随机分为三组:正常对照组(n=10)、TNBS模型组(n=21)和GM-CSF干预组(n=22)。GM-CSF干预组小鼠连续10天皮下注射重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子,剂量为100ug/d/kg(体重);TNBS模型组小鼠连续10天皮下注射等量生理盐水;正常对照组自然喂养。在第11天,给予TNBS模型组和GM-CSF干预组小鼠直肠内灌注三硝基苯磺酸(TNBS)诱导结肠炎,剂量为3mg/只小鼠(溶于50%乙醇)。一周后处死,三组实验动物均评价死亡率、体重、结肠长度,观察结肠粘膜大体形态并进行组织学评分(Amehocriteria评分法),采用RT-PCR法定量测定结肠组织中IFN-γ和IL-10 mRNA的表达。GM-CSF干预组还测定给药前后小鼠外周血的白细胞计数。
结果:GM-CSF干预组小鼠给药后外周血白细胞计数较给药前增高了(10.63×10<9>/L,vs.7.89×10<9>/L,P=0.0048)。与TNBS模型组相比,GM-CSF干预组小鼠的死亡率较低(31.82% vs.66.67%,P=0.022),体重下降较少(+0.03g vs.-1.44g,P=0.0006)、结肠长度较长(10.33cm vs.9.01cm,P=0.0002),结肠组织学评分较低(1分vs.2分,P=0.0087)。与正常对照组相比,TNBS模型组结肠组织中的IFN-γ mRNA的表达上调(P<0.01)而IL-10 mRNA的表达有下调的趋势(P>0.05);与TNBS模型组相比,GM-CSF干预组结肠组织中IFN-γ mRNA的表达下调(P<0.01)而IL-10 mRNA的表达有上调的趋势(P>0.05)。
结论:rHuGM-CSF对TNBS诱导的小鼠结肠炎症损伤有预防作用,这可能与它抑制IFN-γ mRNA的表达有关。