【摘 要】
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通过长期或短期保存精液后进行人工授精是加速优秀种畜的繁育的关键技术之一。精液长期保存的方法主要是冷冻保存。已证明,山羊精液冷冻引起精子超微结构、生化和功能的损伤
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通过长期或短期保存精液后进行人工授精是加速优秀种畜的繁育的关键技术之一。精液长期保存的方法主要是冷冻保存。已证明,山羊精液冷冻引起精子超微结构、生化和功能的损伤。应用冷冻保存的山羊精液输精时,情期受胎率一直比较低(50%左右),限制了该技术在生产中的应用。因此,人们正在探索山羊精液短期保存即液态保存。这方面研究国内外报道都很少,维持精子活力在30%以上的保存时间最长为7天,受胎率还未见报道。液态保存山羊精液达到80%以上受胎率的时间很短,不超过72小时。2005年我们实验室自己研制了一种液态保存稀释液mZAP,1:10稀释后5℃条件下精子活力维持30%以上的时间达到了9天,这在国际上当时已经是最长的液态保存时间了。这就为山羊精液液态保存研究提供了一个非常好的基础,也让我们看到了液态保存的保存时间还是大有延长余地的。因此,我们在此基础上进行了进一步研究,希望能够使保存时间进一步延长。研究了降温速率,定期对保存的精液重悬浮一次,向mZAP稀释液中加入不同含量的卵黄(0%,2%,5%,20%),不同pH包被(pH6.04和pH6.6),包被后不同稀释比例,保存过程中对稀释液进行处理对保存效果的影响。结果发现,50ml水降温方法造成精子活力下降是由于30到15℃降温速率太快所致,每天对保存的精液重悬浮一次并未提高精液的保存效果,在秋季向mZAP稀释液中加入2%卵黄保存效果最好,而在春季以不添加卵黄为好,两种pH值包被后都提高了保存效果,包被后1:20稀释保存效果最好,另外保存过程中对稀释液处理提高了mZAP和Androhep稀释液的保存效果,也使包被后1:10和1:20稀释的保存效果得到了提高,最终使精子保存时间延长到了13天,体外受精结果显示,保存13天的精子对卵母细胞受精后得到了56.5%的卵裂率和13.6%的桑囊胚率,低于鲜精的68.9%的卵裂率和18.9%的桑囊胚率,但仍有受精能力。
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