论文部分内容阅读
本试验选取了两株产乳酸芽胞杆菌BLZ01和SPL01,用试剂盒测定乳酸类型,并根据细菌菌落形态和生理生化特征对BLZ01和SPL01进行初步的鉴定,再结合16SrRNA测序结果鉴定该两株芽胞杆菌。通过单因素试验,对它们的培养基进行了初步的优化。采用动物试验,研究它们对肉鸡生长性能、屠宰性能、部分免疫指标及肠道菌群数量和多样性的影响。试验主要内容和结果如下：1.通过对细菌培养、革兰染色,对BLZ01和SPL01进行形态学分析。再结合它们各自的生理生化特征及16S rRNA分析。结果,BLZ01被鉴定为产左旋乳酸的巨大芽胞杆菌(Bacillus megaterium), SPLO1为产乳酸的蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus)。2.使用单因素试验,运用生产中经常使用的发酵原材料,把BLZ01与SPL01的培养基进行初步优化。结果,芽胞杆菌BLZ01的最佳培养基为：葡萄糖10 g/L,玉米粉10 g/L,黄豆粉15 g/L,菜籽粕5g/L,鱼粉10 g/L,尿素2 g/L,碳酸钙2g/L氯化钠5g/L, MgSO4 0.2g/L, pH为7.2～7.5。芽胞杆菌SPL01的最佳培养基为：葡萄糖10 g/L,玉米粉1 0g/L,黄豆粉10 g/L,菜籽粕5 g/L,鱼粉10g/L,尿素2 g/L,碳酸钙5 g/L,氯化钠5g/L, MgSO4 0.5 g/L。3.选取150羽7日龄肉鸡进行试验,随机分成5组,每组3个重复,每个重复10只。其中A为对照组,饲喂基础日粮；B组饲喂基础日粮添加0.05%巨大芽胞杆菌BLZ01菌粉；C组饲喂基础日粮添加0.05%蜡样芽胞杆菌SPL01菌粉；D组饲喂基础日粮添加0.05%巨大芽胞杆菌BLZ01菌粉和0.05%蜡样芽胞杆菌SPL01菌粉；E组饲喂基础日粮添加0.1%添加巨大芽胞杆菌BLZ01菌粉和0.1%蜡样芽胞杆菌SPL01菌粉。(1)生长性能：在平均日增重方面,四个试验组均显著性高于对照组(P<0.05),虽然复合活菌制剂D组和E组均高于单菌制剂B组和C组,但差异不显著(P>0.05)。在料重比方面,四个试验组均低于对照组。在屠宰性能方面,四个试验组的净膛率、胸肌率和腿肌率均显著性高于对照组(P<0.05),且复合活菌制剂D组的胸肌率均显著性高于B组和C组(P<0.05),且复合活菌制剂E组的屠宰率、腿肌率均显著性高于B组和C组(P<0.05)。在基础日粮中添加BLZ01和SPL01菌粉均能显著性提高肉鸡的增重及屠宰性能,且能降低料重比,同时BLZ01和SPL01的复合活菌制剂效果更优于它们各自的单菌制剂效果。(2)肉鸡免疫性能：虽然BLZ01和SPL01能提高部分肉鸡的免疫器官指数和新城疫抗体效价,但我们认为它们不具有显著性提高肉鸡免疫功能的作用。(3)肉鸡肠道菌群：四个试验组回肠的乳酸杆菌、双歧杆菌数量均高于对照组,除C组乳酸杆菌差异不显著(P>0.05),其它组差异均显著(P<0.05)；盲肠中乳酸菌数量高于对照组,但差异不显著(P>0.05)。四个试验组回肠、盲肠的大肠杆菌和肠球菌数量均有所下降,且存在显著性差异(P<0.05)。说明BLZ01和SPL01具有促进肉鸡肠道中乳酸杆菌和双歧杆菌有益菌生长的作用,同时抑制大肠杆菌等病原菌的繁殖。(4) PCR-DGGE结果：通过Quantity one软件分析发现,肉鸡回肠、盲肠中均存在各自的特异性菌群,且存在较大的差异,即使饲喂BLZ01和SPL01均不能改变这种差异。在基础日粮中添加BLZ01和SPL01可使肉鸡回肠、盲肠的肠道菌群种类发生了较大的变化,且肠道菌种数量也得到了提高。回收的条带中已培养出的细菌是以乳杆菌属为主,包括唾液乳杆菌、口乳杆菌、乳酸杆菌和德氏乳杆菌,占已培养出细菌条带的44.4%。说明BLZ01和SPL01具有提高肉鸡肠道菌群的多样性和种群密度的作用。