【摘 要】
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姜黄素(curcumin)是姜黄属植物根茎的提取物,是一类天然线性二芳基庚酮类化合物,为略带酸性的酚类物质,具有抗炎、抗感染、降低血脂、调节免疫功能、抗氧化、清除自由基等作
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姜黄素(curcumin)是姜黄属植物根茎的提取物,是一类天然线性二芳基庚酮类化合物,为略带酸性的酚类物质,具有抗炎、抗感染、降低血脂、调节免疫功能、抗氧化、清除自由基等作用。随着对姜黄素研究的深入,发现其在神经系统疾病中也有较好的应用价值,如阿尔茨海默病、帕金森病、神经疼痛和神经系统肿瘤等[6]。但在帕金森病方面的研究较少,尤其是姜黄素在帕金森病的自噬机制中的作用研究还有很多空白。本实验以经典的神经毒性药物1-甲基-4-苯基吡啶离子MPP+诱导PC12细胞构建帕金森病模型[7 8],通过检测相关指标的表达,探究姜黄素对自噬的调节及对PC12细胞的保护作用。目的通过比较损伤组和姜黄素干预组的细胞存活率、ROS生成量、线粒体膜电位,以及自噬相关蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ、P62的表达水平,探究姜黄素对MPP+损伤的PC12细胞是否具有保护性作用,且以自噬途径对MPP+诱导的PC12细胞帕金森病细胞模型的发挥保护性作用。方法以终浓度为500μmol/l的MPP+处理PC12细胞24h,制造帕金森病细胞模型,应用CCK-8检测细胞存活率,流式细胞仪检测DCFH-DA荧光探针标记细胞内活性氧ROS生成量、Rh123染色线粒体膜电位(ΔΨm),蛋白质印迹(Western blot)方法检测自噬相关蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ、P62表达水平。结果损伤组与正常培养的对照组相比较,细胞存活率明显降低、线粒体跨膜电位(ΔΨm)荧光强度明显升高、活性氧ROS含量明显升高、自噬相关蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ和P62表达水平明显升高;姜黄素干预组(cur10μmol/l、cur20μmol/l、cur40μmol/l、cur80μmol/l)与损伤组相比较,细胞存活率升高、线粒体跨膜电位(ΔΨm)荧光强度降低、活性氧ROS含量降低、自噬相关蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ和P62表达水平降低。结论姜黄素能够以自噬机制途径对MPP+诱导的PC12细胞帕金森病模型发挥保护性作用,且随姜黄素浓度的增大其保护作用越强。
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