阿托伐他汀对体外大鼠成骨细胞代谢的影响

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目的:探讨不同浓度阿托伐他汀钙促进成骨细胞(osteoblast, OB)增殖、分化和矿化能力影响的作用和机制。 方法:取出生24 小时SD大鼠颅骨,用机械分离和酶消化法进行成骨细胞培养,以细胞形态学、碱性磷酸酶染色和矿化结节染色鉴定。取传1 代成骨细胞给予10-5 mol/L、10-6 mol/L、10-7 mol/L 三种不同浓度的阿托伐他汀,并设空白和雌激素10-8 mol/L 为对照组,在培养24、48、72 小时时,取各个时间段细胞上清液,应用荧光检测抗体-抗原结合物的方法(ELISA 法)测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和护骨素(OPG),在培养72 小时,观察(OB)增殖能力(四唑盐法,即MTT 法)、成骨细胞碱性磷酸酶活性(ALP)(对-硝基苯磷酸盐即PNPP 法),培养1 月后观察OB 矿化结节形成能力(茜素红染色)。 结果: 1,与空白对照组比较,阿托伐他汀10-5 mol/L、阿托伐他汀10-6 mol/L 和阿托伐他汀10-7 mol/L 组培养至48、72 小时后,其OPG 的含量明显升高,有显著差异(P=0.003、P=0.0167、P=0.024),而三组之间的比较,无显著差异(P>0.05)。 2,阿托伐他汀各组与雌激素组比较,OPG的含量无显著差异(P>0.05)。 3,各组细胞液中TNF-α含量无显著差异(P>0.05)。 4,阿托伐他汀对细胞增殖率有促进作用。 5,阿托伐他汀对ALP 活性有促进作用。 6,在矿化结节的数量上,阿托伐他汀10-5mol/L 与空白对照组比较存在显著差异(P=0.0235);阿托伐他汀10-5mol/L 组与雌激素10-8 mol/L 组之间比较无显著差异(P=0.0504);三组阿托伐他汀之间有显著差异(P=0.0438);阿托伐他汀10-5 mol/L 组与阿托伐他汀10-7 mol/L 组之间比较有显著差异(P=0.0347)。而在矿化结节的面积上,与空白对照组比较,阿托伐他汀10-5 mol/L 组与阿托伐他汀10-6 mol/L 组增加明显。 结论: 1,各组阿托伐他汀均能明显提高OB 的OP的表达。 2,阿托伐他汀对OB的增殖率有促进作用。 3,阿托伐他汀对OB的分化有促进作用。 4,高浓度阿托伐他汀能够使SD大鼠OB形成的矿化结节数量、面积增多。
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