低氧诱导因子1α及其目的基因在实验性脊髓损伤中表达的研究

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低氧诱导因子1α(HIF-1α)是在低氧诱导下产生的一种具有转录活性的因子,它可以激活一系列目的基因,使组织和细胞耐受或改善缺血缺氧环境。而继发性脊髓损伤中的缺血缺氧损害是造成脊髓损伤进一步加重的关键性因素,本研究的目的就是通过了解HIF-1α及其目的基因在损伤脊髓中的表达情况和变化规律,以探讨HIF-1α及其目的基因在脊髓损伤中的作用。在本研究中采用静态压迫模型造成大鼠的脊髓损伤,并在不同时段进行观察,观察时间由6 小时到2 周,以正常大鼠脊髓作为对照。在第一部分实验中我们分别从RNA 和蛋白水平对HIF-1α在脊髓损伤中的表达和变化趋势进行了研究。通过RT-PCR 和原位杂交技术对HIF-1αmRNA 进行了的分析显示HIF-1αmRNA从脊髓损伤后的12 小时起就出现明显的增加,在伤后第3 天达到高峰;用单克隆抗体检测了HIF-1α的蛋白表达,结果显示HIF-1α蛋白的积聚早于mRNA。在第二部分实验中我们对受HIF-1α调控的一部分目的基因进行了研究。通过酶组织化学方法检测了糖酵解酶类中的M 型乳酸脱氢酶(LDH-M)和醛缩酶(ALD),用免疫组织化学技术测定了与微循环调控有关的诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)
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