溶澡弧菌PCR检测及SSCP在毒力株鉴定的应用

来源 :广东海洋大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:SF20070601ZW126com
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本研究选择gyrB基因为靶基因,以溶藻弧菌种特异性区域设计特异性引物,该引物能将典型溶藻弧菌与其它弧菌或非弧菌细菌区分开来。为了进一步验证该检测技术的准确性,进行为期一年的实样检测。该PCR从874株细菌里检测出77株阳性菌,经过SSCP分析,该77株阳性菌分属于4个分子型,通过对不同分子型的阳性菌株进行抽样测序,结果表明抽选的所有阳性菌株的gyrB基因片段序列与溶藻弧菌的同源性最高,由此认为均为溶藻弧菌,所以该PCR检测技术准确率为100%。基于gyrB基因片段的SSCP分型,可将77株溶藻弧菌分为4个分子型:a、b、c和d型,而基于胶原蛋白酶基因片段的分型,可将77株溶藻弧菌分为13个分子型:A1、A2、A3、A4、B、C、D、E、F、G1、G2、H和I型,分辨率得到很大提高。其中A1型是优势分子型,占总数的48.1%。从南油分离的菌株的多态性明显高于特呈和麻斜,25个菌株包含了11个分子型,其中A3、A4、E、G1和G2型,是南油所独有的,A2型也主要分布于南油。从麻斜分离的菌株的多念性也较为丰富,29个菌株可分出7个分子型,其中H和I型是麻斜独有的。从特呈分离的菌株的多态性最低,23个菌株只包含4个分子型。除了D型主要分布于特呈外,其它三个分子型都普遍存在于三个养殖区。根据gyrB和胶原蛋白酶-SSCP型的组合将细菌分组,每个组合代表一种基因遗传型,可分为15个遗传型,然后每组随机挑选若干菌株进行致病性实验。发现溶藻弧菌的毒力与胶原蛋白酶-SSCP分型呈相关关系(r=0.438 p<0.01)。A1、A2、A3、B、C、F、G1和I型的菌株都属于弱毒株,A4、D、E、G2和H型的菌株属于强毒株。由于SSCP的高度灵敏性,有理由相信相同的菌株只能产生唯一的胶原蛋白酶-SSCP指纹图谱,因此这种分子标记技术完全能够鉴定重新分离的株系是否与已有的毒力株相同,从而为准确鉴定溶藻弧菌的毒力株提供有力的证据。
其他文献
为反映我国SO2污染的时空演变规律,通过半方差分析和克里格空间内插法,对1990年,1995年和2000年主要城市的SO2年日均浓度进行了空间分析,发现SO2浓度空间分布的结构性在不断
利用三步电沉积法制备C/Cu(Fe)复合材料预制丝,将预制丝缠绕成毛坯,采用真空热压法制备C/Cu(Fe)复合材料.研究表明,真空热压工艺对复合材料力学性能有很大影响,通过力学性能
在高过载测试中,缓冲材料的选取直接的影响到缓冲结构的性能,通过对指标缓冲效率的分析,选取了铝及其合金泡沫铝作为缓冲材料,对其在高过载防护方面的一些特性进行了分析.设
为提高苯丙复合乳液的耐水性和耐侯性,以苯乙烯、丙烯酸为核单体,丙烯酸丁酯、丙烯酸、乙烯基三乙氧基硅烷为壳单体,采用半连续核壳乳液聚合工艺制备苯丙复合乳液;研究了乳化
黄颡鱼种类较多、分布广泛,我国从珠江到黑龙江等水域均有分布,是一种小型的经济淡水鱼类。雄性黄颡鱼具有筑巢产卵保护子代的习性,通过这种习性来保证自己和雌性黄颡鱼顺利地进
第六届商业信息化展会在艾克杏林湾大酒店的康体楼盛大举行。与往届展会相比,本次展会的展场开阔、敞亮、气势恢宏,前来参展的厂家更是刷新了记录,达到近百家。现场名企云集,
2013第八届中国国际轨道交通展览会将于今年6月4日在上海新国际博览中心举行。展览会得到了中国南车、中国北车以及庞巴迪等世界知名跨国公司的参与和大力支持。截止到目前,
海洋吸收了大气中的二氧化碳使得海水酸化从而对海洋生物尤其是钙化生物产生很大程度的影响。颗石藻是一种广泛分布的钙化浮游植物并且能够产生大量的海水碳酸钙。然而,在实验
“如果你曾经纳闷价格是如何决定的,你将在《定价耍心机》中找到答案。本书对今日新经济时代有最全面通透的解析,当中的真知灼见可谓无价,”这是华盛顿商学院市场行销学教授
1989年,玛丽(米西)·卡明斯(Mary(Missy)Cummings)驾驶一架喷气式战斗机第一次降落在航空母舰上。不过这位年纪轻轻的飞行员的高兴劲并没持续多久。几分钟后,一位亲密战友在尝试同样的降落时死亡。  尽管美国海军一直没有查明导致在墨西哥湾列克星敦号航空母舰上的坠毁事件的原因,卡明斯怀疑是技术搅了浑水。“我没法告诉你有多少朋友死于设计缺陷,”她回忆起自己服役的岁月, “作为一名飞行员,