研究背景与目的：　　血管内皮细胞（HUVECs）在维持心血管系统的功能稳态中起着重要的作用，血管内皮细胞功能异常化是导致糖尿病血管并发症的启动因素。研究表明高糖能诱导血管内皮细胞发生氧化应激反应，产生大量活性氧，导致一系列的炎症反应，进而导致血管内皮细胞凋亡并引发动脉粥样硬化。因此，保护血管内皮细胞对防止血管并发症的发生具有重要作用。吴茱萸碱是从吴茱萸成熟果实中分离出来的生物碱化合物，具有抗炎症作用，但抗炎机制尚不明确。P2 X4受体是ATP受体的一个亚型，其过表达伴随着细胞内Ca2+浓度的升高，在疼痛、炎症反应和免疫反应中具有重要作用，但对P2X4受体是否在高糖诱导的HUVECs发生炎症反应中起重要作用鲜有报道。本实验旨在研究吴茱萸碱对慢性高葡萄糖引起HUVECs产生炎症反应的保护作用及靶点，为糖尿病及其并发症的防治提供新的依据。通过高葡萄糖刺激血管内皮细胞5天后，检测P2X4受体、细胞核转录因子κB（NF-κB）、ROS、钙离子（Ca2+）及一些炎症因子的变化，探索吴茱萸碱对慢性高葡萄糖引起HUVEC s产生炎症反应的保护作用及机制。　　方法：　　(1)吴茱萸碱对细胞增殖的影响以浓度为0、0.1、0.25、0.5、1、4、8μM/L的吴茱萸碱分别处理血管内皮细胞24h、48h和72h，通过MTS测细胞增殖。　　(2)细胞传代后将细胞分为正常葡萄糖组（5.5Mm, CON）、高葡萄糖刺激组（44.4Mm,HG）、正常葡萄糖加吴茱萸碱组（CON+Evo）、高葡萄糖刺激加吴茱萸碱组（HG+Evo）。高糖处理2天后加入吴茱萸碱，共同处理3天，隔两天换一次液。 MTS测细胞增殖。　　(3)提取各组细胞、总RNA，通过Real Time PCR检测P2X4受体mRNA表达变化。　　(4)提取各组细胞总蛋白、核蛋白，通过蛋白印记检测P2X4受体、肿瘤坏死因子（TNF-ɑ）、NF-κB的蛋白表达变化。　　(5)荧光法检测细胞内ROS和Ca2+的变化，应用硝酸还原酶法检测细胞上清液一氧化氮（NO）的变化。　　结果：　　(1)吴茱萸碱对HUVECs增殖的抑制是时间和剂量依赖性的，4μM吴茱萸碱处理24h显著抑制HUVECs的增殖（p<0.05），0.25μM的吴茱萸碱处理细胞3天不会对细胞增殖产生影响。　　(2)高糖显著抑制HUVECs的增殖（p<0.01），0.25μM的吴茱萸碱能逆转这种抑制。　　(3)与 CON组相比，HG组 P2X4受体在 mRNA及蛋白水平表达量均升高（p<0.05），而HG+Evo组，与HG组相比，P2X4受体表达量降低（p<0.05）。　　(4)同时，HG组，TNF-ɑ和NF-κB表达上调（p<0.05），与HG组相比， HG+Evo组表达下降（p<0.05）。　　(5)与CON组相比，HG组细胞内ROS和Ca2+浓度升高（p<0.05），细胞上清液NO含量显著下降（p<0.01），而与HG组相比，HG+Evo组细胞内ROS和Ca2+浓度均下降（p<0.05），细胞上清液NO含量显著上升（p<0.01）。　　结论：　　高糖诱导血管内皮细胞中TNF-ɑ和NF-κB表达上调，增加细胞内ROS和Ca2+浓度，降低细胞上清液NO含量，同时伴随P2X4受体表达量的升高，吴茱萸碱能降低 P2X4受体表达，逆转炎症反应。吴茱萸碱有可能通过抑制 P2X4受体信号通路保护血管内皮细胞免受高糖引起的炎症反应。