脱氧雪腐镰刀菌烯醇对鸡胸腺微循环的影响

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胸腺是胚胎期发生最早的淋巴组织,属于中枢(初级)免疫器官之一,是T淋巴细胞分化、发育和成熟的场所,具有免疫调节作用和屏障作用,并能建立自身抗原耐受性及维持免疫自稳。因此,胸腺在维持机体正常免疫平衡中起着重要作用。胸腺的功能水平受到微循环状态的影响。而目前仍鲜有从总体及微观角度对胸腺微循环构架的研究。鸡没有像哺乳动物那样完整的淋巴结,仅存在着分散的以淋巴小结为主的淋巴组织,实现对淋巴液的过滤,执行自身的免疫功能。因此,胸腺的功能水平在鸡的免疫功能中占有很重要的部分。脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)又称作呕吐毒素(vomitoxin,VT)既是一种免疫抑制剂,又是一种免疫促进剂,其对免疫系统的影响引起人们极大的兴趣。而其对免疫器官微循环的影响又直接地与微循环的改变相关。核因子-kappa B(nuclear factor-kappa B,NF-κB)是一种多效性的转录因子,受到刺激活化后,能调控前炎性细胞因子、细胞表面受体、转录因子、粘附分子等的生成。而这些刺激因素及其调控的因子与微循环障碍的发生、发展均有着密切的关系。因此,本试验旨在通过研究鸡胸腺微循环的形态学特征,微血管结构以及静脉注射DON后鸡胸腺微循环及其NF-κB活性的改变等,探讨DON对鸡胸腺微循环及细胞免疫机制的影响。  本试验共选用健康湛江鸡70只,其中10只用于微血管形态学研究。另外60只用于DON对鸡胸腺微循环影响的研究,用随机数字表法把鸡分成正常对照组(NC,n=30)和静脉注射DON组(DON,n=30),每组分别设5个小组,分别为5个时间点,0时,15min,30min,45min和60min,每个小组(即每个时间点)6只鸡。所有鸡试验前称重。微循环形态学研究组主要通过微循环观察显微镜进行活体观察,通过墨汁灌注后做血管透明标本和组织切片等方法观察记录微血管总体走向,血管细微结构等。DON组静脉注射DON(1mg/kg体重),分别将0时,15min,30min,45min和60min小组的各6只鸡只在左侧手术取下一叶胸腺,用夹心酶联免疫的方法定量检测核因子-κB的活性;将0时,30min,60min小组的6只鸡只在右侧取下一叶胸腺,固定后做成组织切片,做HE染色和核因子-κB免疫组化染色。NC组则注射等量的生理盐水,其余操作与DON组完全相同。  结果表明:供应胸腺的主要动脉血管,来源于颈动脉的分支,独立地分支进入胸腺,接近腺体的中央部位,分支成血管树经过实质形成毛细血管网。这些毛细血管垂直朝向胸腺表面,或加入浅表的毛细血管丛,或伴随这些毛细血管丛一段距离然后返回髓质,形成毛细血管袢。前毛细血管连接广泛的静脉丛,组成不规则的毛细血管网,其毛细血管后微静脉加入到皮髓交界处的静脉中汇入腺体表面的血管,进而在胸腺附近构成静脉树,汇集的胸腺静脉最后注入到颈浅静脉。注射DON后,组织切片可观察到微血管通透性增高,微血管管径变化,微血管变形,毛细血管后小静脉内白细胞聚集和附壁等现象。胸腺细胞本身对NF-κB就有一定程度的激活作用,主要激活部位在皮髓质交界处一些血管、胸腺小体样的细胞团块等部位。静脉注射DON后,在上述部位有强度更高的阳性反应,并且分布范围更广。试验组的胸腺内核因子-κB活性增强,半小时达到峰值,随后逐渐下降。表明DON对NF-κB有激活作用并影响着胸腺微循环的功能水平。
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