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目的: 选取4种中药成分或组分及3种酶抑制剂单用或联用进行MTT抗肿瘤筛选，比较药物对3种人肺腺癌细胞生长的影响。并通过细胞克隆形成实验进行复筛，明确具有抗肿瘤作用的药物成分。并结合肿瘤细胞的周期分布和细胞凋亡，NO-cGMP信号通路，氧化应激水平，探讨药物的抗肿瘤效果及作用机理。 方法: 1.MTT法初步筛选有效抗肿瘤药物:体外培养人肺腺癌细胞A549，H460，SPC-A-1等3种细胞株。以MTT法评价知母皂苷AⅢ，毛蕊异黄酮，刘寄奴总黄酮，甘草总黄酮和一氧化氮合酶抑制剂L-NMMA，诱导性一氧化氮合酶抑制剂W1400，磷酸二酯酶5(PDE5)选择性抑制剂Zaprinast分别作用3种人肺腺癌细胞12，24，48，72h的急性细胞毒作用。 2.比较知母皂苷MⅢ，W1400与Zaprinast联用对3种人肺腺癌细胞生长的影响:体外培养人肺腺癌细胞A549，H460，SPC-A-1等3种细胞株。以MTT法评价知母皂苷AⅢ，W1400与Zaprinast联用对这3种人肺腺癌细胞24，48，72h的急性细胞毒作用，筛选出具有抗肿瘤作用的药物成分及作用浓度梯度，观察药物的量效性和时效性。通过计算比较IC50明确药物敏感性细胞株。 3.知母皂苷AⅢ抑制人肺腺癌SPC-A-1细胞的体外药效学研究:细胞克隆形成、PI单染法检测细胞周期分布、AnnexinⅤ-PI双染法检测细胞凋亡，深入评价知母皂苷AⅢ对人肺腺癌SPC-A-1细胞的显著生长抑制作用。 4.分析知母皂苷AⅢ作用人肺腺癌SPC-A-1细胞的药效学机制: (1)知母皂苷AⅢ对SPC-A-1细胞凋亡的影响:光镜下形态学观察、Westernblot检测知母皂苷AⅢ对SPC-A-1细胞Caspase-3及活化形式Cleaved-caspase-3表达的影响。 (2)知母皂菅AⅢ对SPC-A-1细胞增殖生长影响: Western blot检测知母皂苷AⅢ对SPC-A-1细胞内增殖细胞核抗原PCNA表达的影响。 (3)知母皂苷AⅢ对SPC-A-1细胞氧化应激的影响:以分光光度法检测知母皂苷AⅢ对SPC-A-1细胞内MDA含量和抗氧化系统的影响。 (4)知母皂苷AⅢ对SPC-A-1细胞NO-cGMP信号通路的影响:以分光光度法，Elisa试剂盒，Western blot分别检测知母皂苷AⅢ对SPC-A-1细胞内NO，cGMP含量的影响及iNOS的表达变化情况。 结果: 1.一定浓度知母皂苷AⅢ，毛蕊异黄酮，L-NMMA，W1400，Zaprinast分别作用3种人肺腺癌细胞A549，H460，SPC-A-1不同时间，对细胞生长有不同程度的抑制作用:诱导性一氧化氮合酶抑制剂W1400抑制效果强于一氧化氮合酶抑制剂L-NMMA;知母皂苷AⅢ对3种人肺腺癌细胞的生长抑制效果最显著;刘寄奴总黄酮、甘草总黄酮则无明显效果。 2.W1400与Zaprinast联用抑制效果优于分别单用，但单用或联用均不及知母皂苷AⅢ药效;对于人肺腺癌SPC-A-1细胞的生长抑制，知母皂苷AⅢ药效最好:24，48，72h的IC50分别为22.79，10.34，8.98μM。 3.知母皂苷AⅢ对3种人肺腺癌细胞A549，H460，SPC-A-1均体现出显著的体外抑制作用，呈现一定的剂量和时间依赖趋势，且对SPC-A-1细胞的抑制作用最强。因此，后续实验选择知母皂苷AⅢ作用于人肺腺癌SPC-A-1细胞。知母皂苷AⅢ可显著抑制人肺腺癌细胞SPC-A-1克隆形成;SPC-A-1细胞被明显阻滞在G0/G1期，而S期、G2/M期的比例逐渐降低;知母皂苷AⅢ能促进SPC-A-1细胞凋亡。 4.诱导凋亡并非知母皂苷AⅢ对人肺腺癌SPC-A-1细胞抗肿瘤药理学活性的主要机制。 5.知母皂菅AⅢ可能抑制人肺腺癌SPC-A-1细胞的增殖生长。 6.知母皂苷AⅢ可能影响人肺腺癌SPC-A-1细胞的NO-cGMP信号通路，且NO水平下降与细胞凋亡存在相关性。 7.知母皂苷AⅢ可能干扰人肺腺癌SPC-A-1细胞的氧化应激。 结论: 通过4种中药成分或组分及3种酶抑制剂单用或联用的MTT抗肿瘤筛选实验发现:中药成分知母皂苷AⅢ，毛蕊异黄酮及某些酶抑制剂单用或联用对3种人肺腺癌细胞A549、H460、SPC-A-1生长有不同程度的抑制作用;中药组分刘寄奴总黄酮、甘草总黄酮则无明显效果。比较研究发现:知母皂菅AⅢ能显著抑制3种人肺腺癌细胞在体外的生长活力，呈现一定剂量和时间依赖，且对SPC-A-1细胞的抑制作用最强;知母皂苷AⅢ对人肺腺癌SPC-A-1细胞的生长抑制其可能作用机制涉及细胞周期，细胞凋亡和细胞增殖等;知母皂苷AⅢ所诱导的人肺腺癌SPC-A-1细胞凋亡与NO水平存在相关性，氧化应激在知母皂苷AⅢ下调细胞内的NO水平引起的肿瘤细胞凋亡中起重要作用。