槟榔水提液和槟榔碱对小鼠血清代谢物与肠道菌群的影响

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槟榔毒性与致癌性的研究始于西方与印度,该区域人群习惯以蒌叶和熟石灰搭配鲜槟榔来食用。中国大陆尤其是湖南地区惯于食用经过蒸煮点卤等一系列加工步骤得到的干制槟榔。这种经过处理的槟榔,其多酚与槟榔碱成分均被大幅降低。此外,近年随着无烟冷熏工艺的普遍使用,青果槟榔逐渐走向并占据了市场。微生物组学与代谢组学研究的兴起,为我们研究槟榔食用与疾病的关系提供了更好的方法,本试验就是以冷冻粉碎、超声、水浴、离心的方式提取出槟榔成分的水溶液,并采用液相色谱分析其中槟榔碱与槟榔次碱的含量。在此基础上,制得了不同灌胃液给予小鼠,初步探讨了湖南加工型槟榔与疾病的可能关系。主要结果如下:1.通过液相色谱分析得到鲜果、青果、烟果槟榔以及青果成品槟榔水提液的槟榔碱含量分别为:2.71±0.15mg/m L、1.76±0.01mg/m L、1.79±0.01mg/m L和1.30±0.01mg/m L。槟榔次碱含量分别为:0.78±0.05mg/m L、0.42±0.01mg/m L、0.50±0.06mg/m L和0.76±0.01mg/m L。四种槟榔水提液中槟榔碱含量均高于槟榔次碱。青果与烟果槟榔其槟榔碱和槟榔次碱含量均明显低于鲜果槟榔。2.每日给予不同组小鼠灌胃,28天后采取小鼠全血并分析,结果显示与对照组小鼠相比,在相当于成人每日四颗槟榔的剂量下纯槟榔碱水溶液以及不同槟榔的水提液不会造成各组小鼠体重、饲料摄入量以及血常规指标的显著差异。3.采取灌胃28天后的各组小鼠结肠内容物,并以16S宏基因组测序方法分析灌胃开始前与结束后的结肠菌群,结果显示,对照组小鼠与灌胃前的小鼠相比,其乳杆菌属丰度产生显著改变。试验发现烟果槟榔与鲜果槟榔灌胃小鼠结肠菌群在多分类学水平(门、属、种)上产生了明显的差异。两组小鼠肠道菌群中拟杆菌门、厚壁菌门、软壁菌门、拟普雷沃菌属、狄氏副拟杆菌的相对丰度显著改变了,这反映出它们的结肠菌群对碳水化合物的代谢可能具有一定的差异。4.采取灌胃四周的不同组小鼠血清,通过HPLC-MS进行鉴定与定量,结果显示,烟果、青果槟榔液与纯槟榔碱溶液灌胃能显著增加小鼠血清中植物鞘氨醇、枯茗醛、夹竹桃麻素、反式肉桂醛、α-麦角环肽和氢化肉桂酸等代谢物的含量。比较烟果水提液灌胃与纯槟榔碱灌胃小鼠血清中的代谢物,结果显示纯槟榔碱灌胃小鼠血清中黄体酮、没药甾酮、维生素C和柚皮素含量显著较低。此外,其脂质小分子代谢物含量也产生了显著改变。总之,在本试验的剂量下两种槟榔水提液与槟榔碱溶液的灌胃可能对小鼠疾病具有一定的影响作用,这一系列活性代谢物的改变与槟榔液中的槟榔碱成分密切相关。
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