目的:　　 在体外培养的心肌细胞中研究益母草水苏碱对心肌细胞肌浆网钙摄取功能的调控作用。　　 方法:　　 1、心肌细胞的培养:采用“双酶联合”法来消化心肌组织，90min差速贴壁消除成纤维细胞，细胞培养的第3天，进行形态观察、存活率鉴定、活力分析等。　　 2、NE诱导心肌肥大模型的制作与鉴定:心肌细胞原代培养48h后，在培养液中加入NE进行造模。心肌细胞培养第5天收集细胞时，分别进行心肌细胞存活率、活力分析等，同时测定NE诱导的细胞蛋白质浓度、DNA浓度及其比值。　　 3、益母草水苏碱(Sta)的有效性及剂量关系:在确定Sta有效的基础上，心肌细胞原代培养48h后，然后将细胞如下分组:①对照组；②NE组，给予NE10-6mol/L诱导心肌细胞肥大；③在NE存在的基础上，加入不同剂量的Sta。观察心肌肥大的相关指标。　　 4、益母草水苏碱对肌浆网钙摄取功能的调控作用:收集培养的心肌细胞，测定心肌细胞肌浆网对钙的摄取能力；测定肌浆网钙泵活性以及蛋白浓度；PLN的蛋白浓度以及p-PLN的蛋白浓度。　　 结果:　　 1、心肌细胞培养结果显示，正常培养的心肌细胞的存活率为95.93％，搏动频率平均为100次/分。达到细胞培养的目的，能满足后续实验的要求。　　 2、NE(10-6 mol/l)作用于心肌细胞3天后，可以造成心肌细胞数目不变(即DNA浓度不变)，心肌细胞蛋白浓度增加，其蛋白/DNA比值增加，从而反映单个心肌细胞发生肥大。　　 3、模型组与不同剂量的益母草水苏碱比较，蛋白浓度和蛋白/DNA的比值都是增加的，说明不同浓度的益母草水苏碱对心肌细胞肥大具有一定的抑制作用，对心肌细胞具有保护作用，也证明了益母草水苏碱的有效性；不同剂量的益母草水苏碱各组之间并无统计学意义，不存在剂量依赖关系。　　 4、①在心肌细胞肌浆网钙的摄取能力方面:模型组的摄取速率为正常组的67％左右，摄取能力和速度有明显的下降，两者相比具有显著的统计学差异(P<0.05)；与模型组相比，益母草大剂量组的钙摄取速率明显提高15％，两者具有显著的统计学差异(P<0.05)；与益母草小、中剂量组与模型组相比，均无统计学差异(P>0.05)，但是具有升高的趋势。②心肌肌浆网的钙泵的活性方面:与正常组相比，模型组的钙ATP酶活性明显下降，两者相比具有显著的统计学差异(P<0.05)；与模型组相比，益母草水苏碱小剂量组的SERCA2a的活性有一定的提高，但是两者并无统计学差异(P>0.05)；益母草中、大剂量组的SERCA2a的活性有较大的提高，基本提高都在50％左右，均有统计学差异(P<0.05)。③在SERCA蛋白浓度方面，各组之间并无统计学差异。④在PLN蛋白浓度和磷酸化蛋白浓度方面:两者的变化趋势是一致的。与正常组相比，模型组PLN、磷酸化的PLN的蛋白浓度都比正常组显著低，两者具有显著的统计学差异(P<0.05):与模型组相比，不同剂量的益母草水苏碱对PLN、磷酸化的PLN蛋白浓度都有所增加，说明益母草水苏碱可以不同程度的提高磷酸化的PLN蛋白浓度。　　 结论:　　 1、益母草水苏碱能降低NE诱导的新生大鼠的心肌肥大细胞的蛋白质浓度、蛋白/DNA比值，对心肌细胞具有一定的保护作用。　　 2、益母草水苏碱提高NE诱导新生大鼠心肌细胞肌浆网对钙的摄取能力，提高SERCA的活性而蛋白浓度不变、、提高PLN的蛋白浓度和p-PLN的蛋白浓度，但是不同浓度的益母草水苏碱之间并无剂量依赖关系。可能机制为益母草水苏碱就是通过提高肌浆网上的磷酸化的PLN浓度来增加SERCA活性，使心肌肌浆网的钙摄取能力提高，调整心肌肥大细胞钙浓度在正常水平范围内，随后通过一系列传导途径，抑制了心肌细胞的肥大，对心肌细胞具有一定的保护作用。