【摘 要】
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目的：观察Daxx对Chol:MβCD诱导RAW264.7细胞荷脂与凋亡的影响，为延缓动脉粥样硬化的病理改变提供理论依据。方法：人源性Daxx基因重组质粒稳定转染RAW264.7细胞，应用RT-PCR和West
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目的：观察Daxx对Chol:MβCD诱导RAW264.7细胞荷脂与凋亡的影响，为延缓动脉粥样硬化的病理改变提供理论依据。方法：人源性Daxx基因重组质粒稳定转染RAW264.7细胞，应用RT-PCR和Western blot检测稳定转染细胞内Daxx的表达。然后用Chol:MβCD与RAW264.7细胞共同孵育48h，建立RAW264.7细胞荷脂模型，油红O染色和酶荧光法检测细胞内荷脂蓄积情况。MTT检测细胞活性，流式细胞术观察细胞凋亡。Westernblot测定ASK1，JNK，Caspase3的表达情况。结果：转染细胞经G418筛选14天后，RT-PCR和Western blot检测转染细胞内Daxx明显高表达，表明稳定转染成功。Chol:MβCD与RAW264.7细胞共同孵育48h后，结果发现Daxx高表达组细胞胆固醇蓄积明显，并且细胞活性下调，凋亡细胞数目增加；同时Daxx转染细胞组ASK1，JNK，Caspase3蛋白表达明显增高。结论：Daxx可介导Chol:MβCD诱导的巨噬细胞凋亡，其凋亡通路可能与Daxx上调ASK1表达，继之增加下游JNK活性，进一步激活Caspase3有关。
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