MAE是本实验室设计的具有抗菌活性的杂合肽，它是以MagaininⅡ(残基4-14)和Melittin(残基2-13)为亲本，并对序列进行了优化改造后设计出的杂合肽。本文对杂合肽的高级结构进行了模拟，得到了该杂合肽高级结构的初步信息。并以已构建的载体pTYB2-mae为模板，通过PCR扩增出融合基因mae-imein-cbd，将其克隆于表达质粒pPIC9K中，通过鉴定并测序正确后，电转化真核表达宿主——毕赤酵母菌株GS115，通过营养缺陷型培养基筛选重组子，再利用G418抗性筛选出整合有多拷贝外源基因的重组子。按表达手册进行表达实验，挑选出具有高分泌表达水平的菌株，并采用不同的诱导时间、pH值、甲醇诱导浓度进行表达比较，优化出适宜的表达条件。采用优化的表达条件进行大量发酵，对上清液超滤浓缩脱盐后，采用几丁质基质进行亲和层析分离目的蛋白，溴化氰切割，琼脂孔穴法测抗菌活性。结果表明，纯化后的产物具有明显的抗菌活性。 Misgurin是一种从泥鳅中分离出来的，具有强抗菌活性而无溶血活性的抗菌肽，因而有望成为一种抗菌新药。本文根据GENEBANK登录的氨基酸序列，同时考虑构建和表达的需要，化学合成了misgurin基因和接头，采用一种新的策略，在体外将基因多拷贝同向串连，并将其克隆于表达质粒pPIC9K中，通过鉴定并测序正确后，电转化真核表达宿主——毕赤酵母菌株GS115，通过营养缺陷型培养基筛选重组子，再利用G418抗性筛选出整合有多拷贝外源基因的重组子。按表达手册进行初步表达实验，经SDS-PAGE检测表明，酵母重组子分泌出了目的蛋白。