本研究分为三部分： 第一部分：早产儿视网膜病变大鼠模型的建立 目的:建立符合早产儿视网膜病变(ROP)病理特点的大鼠模型。 方法：选择 7日龄新生 Sprague Dawley（SD）大鼠24 只，随机分为正常组和单纯高氧组，将单纯高氧组的12只鼠置于氧浓度75％的容器内连续饲养5天，再置于正常空气环境中饲养至17日龄；正常组的12 只鼠在正常空气环境下饲养至17日龄。通过以下方法观察两组视网膜血管改变：视网膜切片常规HE 染色，计数突破视网膜内界膜的新生血管内皮细胞核数；视网膜铺片经ADP酶染色，了解视网膜血管形态的改变。 结果：P17时正常组新生鼠突破内界膜的血管内皮细胞核数达0.91±0.79个，单纯高氧组22.00±2.98个，差异有显著性意义；视网膜铺片显示单纯高氧组视网膜丧失正常的两层血管网结构，血管分布紊乱，可见大片无灌注区，无灌注区边缘见新生血管芽；正常组同龄小鼠示视盘周围放射状分布的视网膜血管主干较粗，毛细血管网发育良好，无明显无灌注区及新生血管芽。 结论：该视网膜病动物模型与早产儿视网膜病变相似，制备过程简便，可重复性高，并可进行定量研究，故该模型是研究早产儿视网膜病变较为理想的模型。 第二部分：雌二醇对ROP大鼠模型中视网膜新生血管的作用 目的：进行雌二醇抑制ROP新生血管的实验研究，并探讨其机制。 方法：选择7日龄新生SD 大鼠88 只，共分为4组,每组22 只。组1为正常组，组2为单纯高氧组：将7日龄大鼠置于密闭容器内，调节氧气流量，使容器内氧浓度保持在75％，饲养5 d至小鼠12 d龄，然后置于正常空气环境下饲养至17 d龄。组3为雌二醇干预组：饲养同组2，但在小鼠7日龄起行皮下注射17β-雌二醇(E2，溶媒稀释，配制浓度为分别为2g/L)，体积为0.5μL，一次/d至小鼠17 d龄。组7为溶媒干预组，饲养及给药方法同雌二醇干预组，注射溶剂改为相同体积的溶媒。通过HE染色、视网膜铺片观测血管改变和增生情况，免疫组化及RT-PCR检测VEGF、MMP-2在分子及mRNA 水平的表达。 结果：突破内界膜的内皮细胞数四组比较差异有统计学意义，单纯高氧组新生血管较多，有的形成血管索，内皮细胞数较正常组明显增多，雌二醇干预组内皮细胞数较单纯高氧组及溶媒干预组明显减少；视网膜铺片可见雌二醇干预组较之单纯高氧组血管网有不同程度的改善，血管结构清晰，形态基本正常；免疫组织化学染色显示雌二醇干预组 VEGF、MMP-2 表达量较之单纯高氧组及溶媒干预组明显减少；RT-PCR 结果显示: 雌二醇干预组与单纯单纯高氧组及溶媒干预组之间VEGF mRNA和MMP-2 mRNA 表达的差异具有统计学意义。 结论：17β-雌二醇可在一定程度上抑制ROP新生血管的产生，机制可能是抑制了VEGF及MMPs-2的水平有关。 第三部分：17β-雌二醇对高氧诱导的大鼠视网膜细胞凋亡的保护作用 目的: 观察17β-雌二醇对于ROP大鼠模型中视网膜神经节细胞层的细胞凋亡的影响，并初步探讨其机制。 方法: 7 d龄SD新生大鼠48只随机分为4组，每组12只，分为正常对照组、单纯高氧组、雌二醇干预组及溶媒干预组，单纯高氧组置于氧浓度75％的容器内饲养5 d，再置正常空气下饲养至17 d龄，雌二醇干预组饲养方法同单纯高氧组，在大鼠7～17d龄间每日皮下注射17β-雌二醇（E2，溶媒稀释，配制浓度为2g/L）0.5μL/d，溶媒干预组饲养方法同雌二醇干预组，药物改为相同体积溶媒。眼球切片并行TUNEL染色和HE染色，观察4组RGCL层细胞的形态，免疫组化染色观察4组诱生型一氧化氮合酶（iNOS）的表达。 结果：4组小鼠RGCL层均见部分细胞凋亡及TUNEL染色阳性，单纯高氧组的TUNEL阳性细胞数显著多于正常组，雌二醇干预组凋亡细胞数较之单纯高氧组和溶媒干预组减少。免疫组织化学检测iNOS在雌二醇干预组表达较之单纯高氧组降低，单纯高氧组与正常对照组之间的差异有统计学意义。 结论：17β-雌二醇可减少高氧诱导的视网膜细胞凋亡，机制可能与NO 相关。