基于HyBeacon探针的mRNA检测技术在中国人群体液斑溯源鉴定的法医学应用初探

来源 :内蒙古医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:limutou
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目的:本文基于HyBeacon探针检测技术利用实时荧光定量PCR平台,初步探索了6个mRNA遗传标记在中国人群体液斑溯源鉴定中的应用价值。  方法:利用实时荧光定量PCR平台应用HyBeacon探针技术区分外周血、月经血、唾液、阴道分泌物、正常精液和无精精液体液斑迹,验证该方法在中国人群中的准确性和灵敏度,探索该方法在中国人群中的适用性;通过探索该方法对混合检材的适用性、样本存放时间对检测结果的影响及与STR分型技术的兼容性探索该方法对体液斑溯源的适用性;通过对模拟案例及实际案例的检验探索该方法在法医案例鉴定中的应用情况。  结果:准确性验证中,对6种体液斑样本各5例进行检验,检出率为100%,未见假阳性结果。正常精液和无精精液样本可以稳定检出最小体积1μL的斑迹,外周血和唾液样本可以稳定检出最小体积5μL的斑迹。检测常见的4种不同体液构成的混合斑各2例,结果显示对于常见的4种混合斑,除少量无精精液和大量阴道分泌物的混合样本中无精精液出现假阴性结果外,其余均能有效检测。通过对实验室条件下放置3天和14天的6种体液样本各2例进行检测,检出率为100%,未见假阳性结果。随机抽取71个样本进行STR分型检验,除8个样本中含有的无精精液成份未检出外,均能得到完整分型。6例模拟案例中实验样本均得到稳定可靠的检测结果,未出现假阳性结果。在2年卫生巾样本和2例30天无精精斑中均能准确检出体液类型。  结论:基于HyBeacon探针检测技术利用实时荧光定量PCR平台检测6个组织特异性mRNA遗传标记可区分外周血、月经血、唾液、阴道分泌物、正常精液和无精精液体液斑迹。该技术应用于中国人群中准确性高,灵敏度好,适用于混合样本检测,室温存放14天样本仍可准确检出,不影响后续DNA分型,适用于中国人群中体液斑溯源鉴定,可作为补充方法应用于实际检案。
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