盐胁迫对拟南芥根的细胞形态及蛋白质表达影响的研究

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盐的主要成分及衡量指标之一是钠,钠是大多数植物生长所必须的微量元素。盐分浓度过高,一方面会造成作物的水分胁迫、离子胁迫、膜脂过氧化、生理紊乱等多种伤害,另一方面,作物自身又会产生对胁迫的适应。   本实验以模式植物野生型拟南芥为实验材料,120mM盐胁迫处理拟南芥幼苗10天,得到处理组(A3)与对照组(CK)两组材料。经盐胁迫后,拟南芥的根在整体形态上,根尖顶部膨大,直径变大长度变小;次生根直径变化不大但长度变小;根冠表面积及体积均变小约30%;分生区长度变小约30%,直径变大约20%,伸长区长度变小约50%,直径变大约10%;成熟区根毛数量变少约60%~80%,且根毛很短,形态变得不规则。在细胞形态上,根表皮细胞形态变得不规则,对照组细胞为长椭圆形,处理组细胞为短的不规则形状,且出现突起小泡。用四种单克隆抗体,标记半薄切片上的材料,发现JIM5、7识别的果胶类物质其表达量变小,JIM4、8标记的阿拉巴半乳聚糖蛋白表达量也下调。称取对照组和处理组相同重量(0.5g)的根提取蛋白质,称量提取到的蛋白质,发现所得到的干物质,处理组(提取到蛋白质约38mg)的比对照组(提取到蛋白质约23mg)的重约65.2%;蛋白质电泳时,保持一致的上样量,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳后发现小分子量蛋白质表达量变化较大,20kDa蛋白质表达明显上调,51kDA蛋白表达微弱上调,5kDa、23kDa、79kDa蛋白表达微弱下调,其他变化不明显。挖取二维电泳凝胶上差异表达明显的蛋白质点进行质谱分析,已知在p<0.05时,score大于60就具有较高可信度,与数据库比对发现有一个蛋白质点的score达到62,数据库中的这个蛋白含有与拟南芥中转录因子相似的结构。
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