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研究表明雄性不育与生精过程中基因异常有关，因此，研究生精过程中相关基因的功能与调控机制对解决不育问题具有重要意义。Tctex5(T-complex testis expressed 5)是近年来在小鼠中发现的一个可能与雄性生殖有关的基因，是蛋白磷酸酶1(PP1)的潜在抑制子。Tctex5可与PP1的一个亚型PP1γ形成复合体，在此复合体中PP1γ具有提高Tctex5蛋白稳定性的作用。由于体内研究Tctex5基因操作困难，无法研究Tctex5基因在生精过程中的功能，本实验选择三种生殖细胞系A型精原细胞系c18-4、B型精原细胞系CRL-2053、精母细胞系CRL-2196和一个支持细胞系CRL-1715，分别代表精子发生过程中出现的三种生精细胞以及睾丸中的体细胞。通过Western blot、Real-time PCR、细胞免疫荧光及RNA干扰等技术，首先研究了Tctex5与PP1γ基因在这些细胞系中的表达与分布，实验发现Tctex5与PP1γ基因主要分布于细胞核中，Tctex5在c18-4中的表达量最高，其次为CRL-2053和CRL-2196，在CRL-1715中的表达量最低。同样PP1γ在c18-4细胞中的表达量最高，在CRL-1715细胞中最低。为进一步研究小鼠睾丸中Tctex5与PP1γ的关系，我们设计了一对针对Tctex5第一外显子的shRNA序列，分别插入到shRNA表达载体pRNAT-CMV3.1/neo质粒中，将该质粒导入CRL-1715细胞中，经G418稳定筛选，我们获得了能稳定下调Tctex5基因表达的克隆，结果显示PP1γ基因的表达水平以及细胞定位并没有随着Tctex5的下降而发生改变，推测在CRL-1715细胞中PP1γ并不是Tctex5的下游靶蛋白。这些结果为进一步研究Tctex5基因在精子发生过程中的作用以及最终为雄性不育的诊断与治疗提供一些基本信息。