类风湿关节炎患者外周血辅助性T细胞亚群与树突状细胞的关联分析

来源 :福建医科大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:Zero1_41004513
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目的研究辅助T细胞亚群分化及其相关细胞因子对类风湿关节炎病程的影响,探讨树突状细胞亚群、SIRT1的表达与辅助性T细胞亚群分化的关系,进一步阐明类风湿关节炎的发病机制。方法选取94例类风湿关节炎患者和22例相匹配的健康体检者作为正常对照组,将入选的RA患者根据疾病活动性评分(DAS28),分为低度活动期(DAS28≤3.2)、中度活动期组(3.2<DAS28≤5)、高度活动期组(DAS28>5.1)三个亚组。采用流式细胞术检测所有受试者外周血淋巴细胞亚群、DCs(mDC、pDC)、Th1、Th2、Th17、Treg细胞比例;RQ-PCR检测外周血单个核细胞中RORγt、FoxP3及SIRT1mRNA表达水平;ELISA检测血清中细胞因子IFN-γ、IL-4、IL-17、TGF-β,并分析其与DAS28以及实验室炎症反应指标(ESR、hsCRP、RF、抗CCP抗体)的相关性。结果1. RA组CD3+T淋巴细胞的比例与正常对照组比较,差异无显著性意义。而CD3+CD4+T淋巴细胞水平及CD4+/CD8+比值均高于正常对照组(p<0.05),CD3+CD8+T淋巴细胞低于正常对照组(p<0.05);随着RA患者DAS28活动度增加,CD4+T细胞、CD4+/CD8+比值表现增高趋势,但差异无显著性意义(p>0.05)。2.与正常对照组比较,RA组Th1、Th17细胞的百分率均升高(p<0.05),以RA高度活动期组Th17细胞升高最明显(p<0.001),而Th1细胞的百分率随着RA疾病进展有增高的趋势,但在RA各活动期组间差异无显著性意义(p>0.05);Th2细胞在各组间差异无显著性意义(p>0.05);RA组与正常对照组比较,Treg细胞的比例明显降低(p<0.001),Th1/Th2比值显示增高的趋势,然在RA组各组间差异无显著性意义(p>0.05);在RA高度活动期组Th17/Treg比值明显升高(p<0.001),其他各组间差异无显著性意义(p>0.05)。相关分析显示Th17/Treg比值与ESR、hsCRP、DAS28活动指数均呈显著正相关(p<0.05),RA患者外周血Th1/Th2与Th17/Treg呈负相关(p<0.05)。3. RA高度活动期组的RORγt mRNA表达升高(p<0.05),FoxP3mRNA表达降低(p<0.05),而在其他各组间差异无显著性意义(p>0.05)。4.与正常对照组比较,RA组外周血血清中IFN-γ、IL-17的表达水平升高(p<0.05),IFN-γ在RA高度活动期组升高最明显(p<0.001),IL-17随着DAS28活动度增加表现逐渐升高;IL-4水平在RA中度、高度活动期组明显降低(p<0.001); TGF-β水平在RA低度、中度活动期组明显降低(p<0.01),而在高度活动期组则升高(p<0.05);IFN-γ/IL-4比值在RA组明显高于正常对照组(p<0.01),且其比值随着DAS28活动度增加表现逐渐升高。相关分析显示RA患者血清中IL-17、TGF-β的表达水平与ESR、hsCRP、DAS28活动指数均呈显著正相关(p<0.05)。5. RA高度活动期组外周血mDC的表达水平明显降低(p<0.01),其他各组间差异无显著性意义(p>0.05);RA组的pDC的表达水平明显低于正常对照组(p<0.001),pDC在RA高度活动期组降低最明显;RA组mDC/pDC的比值高于正常对照组(p<0.05),而其在RA各活动期组间差异无显著性意义(p>0.05)。6. RA患者外周血mDC水平与Th17、Th17/Treg比值、IFN-γ、IL-17呈负相关(p<0.05);外周血pDC水平与Treg呈正相关(p<0.05),而与Th17/Treg比值、IFN-γ、IL-17、TGF-β呈负相关(p<0.05);mDC/pDC比值与Th17、Treg呈负相关(p<0.05)。7.与低度、中度活动期RA患者和正常对照者相比,高度活动期RA患者外周血单个核细胞SIRT1mRNA表达下调(p<0.05);进行相关分析显示RA患者外周血单个核细胞SIRT1mRNA表达水平与Th1、 Th1/Th2、IFN-γ、IL-17水平呈负相关(p<0.05),与Th2及RORγt、FoxP3mRNA水平呈正相关(p<0.05)。结论1. RA患者外周血存在Th1/Th2、Th17/Treg失衡,尤以Th17/Treg偏移为主,继而导致促炎因子升高,促进RA的发生、发展。2. RA患者外周血存在DC亚群分化不平衡,可能对RA发病中Th17/Treg失衡和细胞因子微环境有一定影响作用。3. SIRT1可能通过影响Th细胞亚群的分化与细胞因子分泌,延缓RA的进展。
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