本文以巨桉Eg5生根苗叶片为外植体，进行了抗生素敏感性实验，及农杆菌GV3101和LBA4404介导Eg5影响因素的研究，建立了两种农杆菌的遗传转化体系，经GUS染色和PCR检测证实获得了农杆菌LBA4404转化的GUS基因植株。本文研究结论如下：1.巴龙霉素抑制外植体再生能力非常强，浓度达到7.14mg·L^-1时可完全抑制叶片再生，达到14.27mg·L^-1可完全抑制外植体愈伤的形成；外植体愈伤组织增殖阶段适宜的卡那霉素筛选质量浓度为17.5mg·L^-1；卡那霉素质量浓度达到60mg·L^-1时，可完全抑制愈伤组织芽分化；卡那霉素质量浓度达到400mg·L^-1时，再生芽的生根率则降低为0，完全抑制再生芽的生根；头孢霉素在0⁵00mg·L^-1范围内试验结果表明0³00mg·L^-1的头孢霉素对外植体的生长分化影响小；共培养结束后外植体经过500mg·L^-1的头孢霉素处理，培养基中添加100mg·L^-1的头孢霉素便可完全抑制农杆菌GV3101、LBA4404的生长。2. GV3101、LBA4404和EHA105三种菌株的瞬时表达率和瞬时表达率指数分别达到64.43%、49.54%、48.10%和0.35、0.32、0.27，不同菌株之间无显著差异，但以菌株GV3101和LBA4404的瞬时转化效果最佳。经过试验优化后农杆菌GV3101转化Eg5的技术参数如下：叶片外植体预培养时间为3d，菌液光密度值OD600nm为0.5，侵染叶片外植体30⁶0min，且以60min为最佳，共培养pH值维持在5.8-6.0之间，共培养基中添加150mg·L^-1乙酰丁香酮，共培养1d。农杆菌LBA4404转化Eg5的研究表明：在叶片外植体预培养3d，菌液浓度OD600nm值为0.5时，侵染叶片外植体45min，于pH值5.8共培养基中共培养3d，瞬时转化效果最佳。正交试验表明共培养时间是影响遗传转化的显著因素。3.农杆菌GV3101介导的遗传转化未获得转化GUS基因植株；LBA4404介导的遗传转化成功获得转GUS基因植株，转化率为0.26%，逃逸率1.49%，PCR初步证实NPTⅡ基因已经成功整合进巨桉Eg5基因组中。