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目的：本研究拟通过炎症细胞因子IL-4、IL-13刺激HT-29MTX(一种可分泌粘蛋白的杯状细胞)细胞,观察其对粘蛋白的调节作用,从而进一步探讨分泌性中耳炎的发病机制。方法：HT-29细胞株复苏培养后,用10-5 mol MTX处理,待细胞生长至80%融合时,传代并鉴定细胞。IL-4、IL-13分别以不同浓度梯度(5 ng/mL、10ng/mL、50 ng/mL、100 ng/mL、200 ng/mL)刺激HT 29-MTX细胞分泌,培养24 h后,收集细胞培养基,并提取细胞RNA,进行粘蛋白及其RNA定量分析。用50ng/mL的IL-4、IL-13不同时间长度(6 h、12 h、24 h、36 h、48 h、72 h)刺激HT29MTX细胞分泌,收集培养基,并提取细胞RNA,进行粘蛋白及其RNA定量分析。每个浓度梯度组及时间梯度组均设相应对照组(加入PBS组)。统计学分析结果。结果：(1)培养于含有IL-4、IL-13培养基的HT29-MTX细胞,当IL-4、IL-13浓度达到10 ng/mL时,随着IL-4、IL-13浓度的增加,HT 29-MTX细胞表达MUC5BmRNA增加且MUC5B蛋白分泌量增加,与空白组相比(p<0.01),差异有统计学意义。(2)HT 29-MTX细胞暴露于50 ng/mL IL-4的培养基时,在12h后,随着时间的延长,HT 29-MTX细胞表达MUC5BmRNA增加且MUC5B蛋白分泌量增加,与空白组相比(p<0.01),差异有统计学意义。(3)HT 29-MTX细胞暴露于50 ng/mL IL-13的培养基时,在24 h后,随着时间的延长,其表达增加且MUC5B蛋白分泌量增加,与空白组相比(p<0.01),差异有统计学意义。(4)在细胞培养整个过程中,加入各种浓度的IL-4、IL-13无出现细胞死亡现象,无表现出细胞毒性。结论：(1)MUC5B参与分泌性中耳炎的病理过程。(2)IL-4、IL-13上调体外培养的杯状细胞MUC5B的分泌,提示其可能参与慢性分泌性中耳炎的病理生理过程,为慢性分泌性中耳炎的治疗提供理论依据。