咪唑苯脲属于均二苯基脲衍生物,是动物专用抗原虫化学药物,对家畜梨形虫病、无浆体病及附红细胞体病等有很好的预防效果和治疗作用,为新一代最佳抗梨形虫药物,是美国药典唯一收录的应用于梨形虫病的治疗药物,临床上一般常用其二丙酸盐或双盐酸盐。在动物体内,该药的主要蓄积器官是肝脏与肾脏,心脏与肌肉次之,脑残留量也很高,可能产生一定的神经毒性。国内外关于咪唑苯脲残留量分析方法的报道主要有分光光度法和液相色谱法,国内尚未颁布动物源性食品中咪唑苯脲残留的检测方法标准。本文建立了动物食品中咪唑苯脲的高效液相色谱检测方法,方法简单、快捷、灵敏、高效,符合药物残留分析的要求。　　 本文取得了如下主要研究成果:　　 1.获得了动物组织中咪唑苯脲的最佳酶解条件根据文献报道,对酶解方法加以改进。分别添加不同体积酶,37℃水浴震荡12h,确定适宜酶量;以最佳酶量,不同温度,不同酶解时间试验,对比结果确定酶解时间和温度。最后确定酶解条件为酶量25μL,温度37℃,时间6h。　　 2.筛选了最佳提取溶剂咪唑苯脲是弱的有机碱,组织中的咪唑苯脲残留以原型药物为主,极性较低。以0.82 mol·L-1盐酸、1 mol·L-1盐酸、甲醇、乙腈、0.2 mol·L-1乙酸、2％三氯乙酸甲醇、丙酮为提取剂,或碱化后直接用提取液提取,对比发现以1mol·L-1盐酸为提取溶剂效果最好。　　 3.优化了咪唑苯脲的净化条件样品前处理过程中咪唑苯脲与盐酸形成盐,净化萃取前需先碱化前处理的水相溶液,使咪唑苯脲以原形存在。水相中加10mol·L-1氢氧化钠溶液2mL调碱性后,加4g固体氯化钠,用提取液为萃取溶剂反相萃取。　　 4.优化了咪唑苯脲的色谱条件咪唑苯脲是一种弱极性有机碱,能与戊烷磺酸钠的阴离子结合,形成离子对。在Crescenzo报道的离子对试剂浓度和流动相梯度比例的基础上加以改进,A液为乙腈,B液为含0.1%三乙胺的0.0075moL·L-1戊烷磺酸钠水溶液(冰醋酸调节pH至3.0),0-4min16%A;4-11min为20%A,11-13min为16%A;流速为1mL·min-1;检测波长为260nm;柱温30℃;进样量20μL,出峰时间调整在10min左右。　　 5.建立了同时检测不同动物的不同组织中咪唑苯脲残留的方法建立了高效液相色谱法同时测定猪、牛、羊等动物的肌肉、脂肪、肝脏、肾脏等组织及奶等14种组织中咪唑苯脲残留检测方法。建立的方法咪唑苯脲在0.01～10μg·mL-1的范围内呈现良好的线性关系,相关系数大于0.999,检测限为0.01μg·g-1,定量限为0.02μg·g-1。在定量限(LOQ)、最高残留限量(MRL)、两倍最高残留限量(2MRL)添加水平下的平均回收率为80%～113%,批内变异系数为0.82%～10.91%,批间变异系数为3.10%～13.57%。