大肠杆菌是人和动物体内的常在菌群之一，主要定居于消化道，其致病性的血清型能导致人和动物的疾病，给人身健康和畜牧业带来巨大的损害。大量抗菌药物的长期使用，使大肠杆菌的耐药性逐渐增强，特别是对20世纪80年代开始使用的喹诺酮类药物的耐药性明显增强。对大肠杆菌喹诺酮类药物耐药机制的研究，发现耐药性的增长不仅与染色体上的基因突变导致的耐药性有关，也有近年新发现的质粒介导qnr基因的喹诺酮耐药机制。鉴定大肠杆菌血清型的分型，能有效了解优势血清型所占的比例，为疾病的治疗提供血清型方面的依据。通过了解大肠杆菌流行的情况，为疾病发生的溯源，对控制疾病的蔓延有重要作用。本实验通过对各地分离的大肠杆菌的耐药性进行检测，了解各地区的大肠杆菌的耐药情况，并检测其中具有高喹诺酮类耐药地区的染色体耐药基因和质粒介导的qnr基因，鉴定qnr基因阳性大肠杆菌的血清型和流行情况，为深入研究qnr基因的耐药机理和流行情况提供理论依据。 实验选用中国兽医药品监察所分离的全国部分地区的大肠杆菌为实验对象，检测其对18种抗菌药物的MIC(minimal inhibitory concentration，MIC)，根据CLSI(clinical and laboratory standards institute，CLSI)推荐的标准判断大肠细菌的耐药程度，从而选择对喹诺酮类药物有高耐药性的地区的菌株，结合各菌株对喹诺酮类药物的MIC检测其染色体耐药基因突变情况和qnr基因阳性菌株，鉴定所获得的21株qnrB阳性基因的大肠杆菌“O”型血清型，并对这21株菌进行PFGE分型。 实验获得以下结果： 1所检测的禽源大肠杆菌的耐药现象非常严重，菌株的多重耐药达到了17耐。采集自不同地区的禽源大肠杆菌对所检测的喹诺酮类抗菌药物呈现不同的交叉耐药现象。但是萘啶酸的耐药情况最为严重，耐药率为84.0％，对其他3种喹诺酮类药物的交叉耐药率达到98.9％—100％。 2实验从采样地所分离的禽源大肠杆菌质粒介导qnr基因以qnrB基因为主。3 qnrB基因不仅能直接增强大肠杆菌对氟喹诺酮类药物的耐药性，也能在对氟喹诺酮类药物敏感的大肠杆菌菌株中被检测出来。单独的qnrB基因仅能引起低浓度的耐药。存在qnrB基因的菌株gyrA基因编码的相应蛋白既存在83位氨基酸的单独替代，即Ser83替代为Leu；也存在gyrA基因编码的83位和87位氨基酸的同时发生替代，Ser83替代为Leu、Asp87替代为Asn。其中存在GyrA蛋白83位和87位氨基酸同时发生替代的菌株的ParC蛋白的80位氨基酸也发生了替代变化，由Ser80替代为ILe。所检测菌株与多重耐药相关的marR基因也发生了突变，使其编码相应蛋白的第3位、第103位、第137位氨基酸发生了替代变化，分别是Ser3替代为Asn、Gly103替代为Ser、Tyr137替代为His。 4 qnrB基因阳性的大肠杆菌的最优势血清型为0107，占95.2％(20/21)，新型致病性血清型。 5通过PFGE对21株qnrB基因阳性的大肠杆菌进行基因分型，结果显示这些大肠杆菌中云南地区大肠杆菌之间的流行病学相关性最高，北京地区的大肠杆菌之间也具有较高的流行病学相关性，但两地间相关程度较低。