【摘 要】
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从149株木腐菌中筛选出30株具有漆酶活力的菌株,对其中漆酶活力最高的血红密孔菌G05(Pycnoporussanguineus)作了进一步研究.该菌漆酶的最适形成条件为:以2﹪麦芽糖为碳源,以0.2
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从149株木腐菌中筛选出30株具有漆酶活力的菌株,对其中漆酶活力最高的血红密孔菌G05(Pycnoporussanguineus)作了进一步研究.该菌漆酶的最适形成条件为:以2﹪麦芽糖为碳源,以0.2﹪酒石酸铵为氮源,在28℃,pH5200rpm摇床振荡培养5天.在最适条件下,漆酶活力可达0.89U/mg菌丝干重.菌体培养液在冷却条件下,过滤得粗酶液,再经硫酸铵沉淀、DEAE-celluloseDE52、SephadexG-100和GephadexG-25柱层析四步纯化获得SDS-PAGE电泳均一的漆酶.纯酶的比活力为3742U/mg蛋白,纯化倍数为37.5倍.用SDS-PAGE测定该酶分子量为64.3KD,薄层凝胶等电聚焦测得该酶等电点为3.8.该酶催化ABTS氧化反应的最适pH为4.5,温度为50℃.在50℃以下、pH4-9之间该酶的稳定性最好.以ABTS为底物的K<,m>为5.02mmol/LV<,max>为6.44μmmol/L/min.
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