糖基化是生命过程中一种十分重要的蛋白质翻译后修饰。然而由于糖肽离子化效率差、高度非均一性以及丰度低等特点，在质谱检测时常常受到非糖肽信号的干扰，因此近些年关于糖肽富集分离方法的研究越来越多。　　本文针对目前已有的富集手段存在的富集效率低，特异性差，操作步骤繁琐，回收率低等问题，运用整体柱的理念制备了一款新型固相富集纯化小柱。小柱制备主要包括两步:首先使用二苯甲酮对枪头聚丙烯内表面进行处理，随后在紫外灯照射下，以两性离子N，N-二甲基（甲基丙烯酰氧乙基）氨基丙磺酸内盐(SPE)为功能单体、季戊四醇三丙烯酸酯(PETA)为交联剂、甲醇和水为致孔剂，在枪头尖端聚合生成整体柱。最后对小柱光处理过程条件以及聚合液中各成分比例分别进行了优化，对优化后小柱进行SEM表征显示柱体与枪头内壁结合紧密，柱体孔结构良好，通过简单的移液枪手动操作即可实现对样品的富集。对于富集小柱首先使用不同寡聚度的葡聚糖梯度混合物进行效果评价，其富集回收率可达到90％以上。随后将小柱应用于免疫球蛋白G中糖肽和糖链的高效富集。通过富集前后MALDI质谱对比图证实了该小柱对于糖肽可进行特异性的富集。对于质量仅为2μg的IgG蛋白酶解液样品进行富集后仍可得到较高信噪比的糖肽信号。最后对比室温储存一个月后的小柱与新制备小柱其富集效果几乎相同，证实其良好的稳定性。