目的:1.建立慢性脑缺血认知障碍大鼠动物模型,观察补肾活血中药首乌益智胶囊改善学习记忆的作用。2.观察首乌益智胶囊对大鼠海马组织VEGF、Shh、Ang-1、Tie-2、Notch4m RNA基因表达影响,探讨首乌益智胶囊促进血管新生的信号调控机制。3.观察首乌益智胶囊对大鼠海马组织Notch1、Hes3及Stat3m RNA基因表达影响,探讨首乌益智胶囊对神经保护作用的信号调控机制。方法:1.采用永久性双侧颈总动脉结扎法建立慢性脑缺血认知障碍大鼠模型,随机分为首乌益智胶囊组、尼莫地平组、模型组、假手术组,每组20只大鼠。首乌益智胶囊组大鼠给予首乌益智胶囊(1 ml/100 g),尼莫地平组给予尼莫地平片(1 ml/100g),模型组及假手术组给予等量的生理盐水灌胃,共28 d。Morris水迷宫检测大鼠的学习记忆能力;电镜下观察大鼠海马组织血管内皮细胞和神经元超微结构;实时定量PCR法检测海马VEGF、Shh、Ang-1、Tie-2、Notch4m RNA及Notch1、Hes3、Stat3m RNA基因表达。结果:1.(1)首乌益智胶囊对VCI模型大鼠学习记忆能力的影响:水迷宫结果表明,首乌益智胶囊组大鼠的定位航行和空间探索实验测试成绩明显优于模型组和尼莫地平组(p<0.01)。(2)首乌益智胶囊对海马缺血周围脑组织微血管密度的影响:模型组、尼莫地平组、首乌益智胶囊组较假手术组依次升高;各组与假手术组相比,有显著性差异(p<0.05,p<0.01);与模型组比较,尼莫地平组、首乌益智胶囊组有显著性差异(p<0.05,p<0.01);与尼莫地平组比较,首乌益智胶囊组差异无显著性(p>0.05)。(3)首乌益智胶囊对VCI模型大鼠海马组织血管内皮细胞超微结构的影响:模型组海马组织微血管内皮细胞胞质以及毛细血管周围高度水肿,血管内皮细胞内线粒体数目减少,线粒体的大部分嵴融合消失,部分核膜融合消失。首乌益智胶囊组和尼莫地平组:镜下表现较模型组均有明显改善,毛细血管周围水肿较模型组轻,基膜基本正常,血管内皮细胞可见较多的线粒体,已接近正常状态。以首乌益智胶囊组对内皮水肿改善最为显著。(4)首乌益智胶囊对VCI模型大鼠海马组织VEGF、Shh、Ang-1、Tie-2、Notch4m RNA的影响:与假手术组比较,模型组、尼莫地平组和首乌益智胶囊组大鼠海马VEGF、Shh,Ang-1、Tie-2、Notch4m RNA表达显著升高(P<0.05~0.01)。与模型组比较,尼莫地平组及首乌益智胶囊组大鼠海马VEGF、Shh,Ang-1、Tie-2、Notch4m RNA表达显著升高(P<0.05~0.01)。与尼莫地平组比较,首乌益智胶囊组大鼠海马VEGF、Shh,Ang-1、Tie-2、Notch4m RNA表达显著升高(P<0.05~0.01)。2.(1)假手术组大鼠海马CA1区神经元各细胞器结构正常。模型组大鼠海马CA1区神经元细胞核膜结构不清,染色质有轻度凝聚,线粒体肿胀、空泡变性,线粒体嵴断裂、甚至消失,游离核糖体减少,胞质内形成空泡区域,细胞周围纤维溶解,粗面内质网数量减少、排列紊乱、疏松、结构模糊。尼莫地平组大鼠海马CA1区神经细胞核膜结构较清晰,可见尼氏体,线粒体肿胀,部分嵴断裂,内质网有扩张,亦出现脱颗粒现象。首乌益智胶囊组大鼠海马CA1区神经细胞核膜结构较清晰,双层核膜可辨,胞质中线粒体、内质网、微管等细胞器丰富且较清晰,尼氏小体呈块状或颗粒状,结构较完整。(2)与假手术组比较,模型组、尼莫地平组和首乌益智胶囊组大鼠海马Notch1、Hes3及Stat3 m RNA表达显著升高(P<0.01)。与模型组比较,尼莫地平组及首乌益智胶囊组大鼠海马Notch1、Hes3及Stat3 m RNA表达显著升高(P<0.05~0.01)。与尼莫地平组比较,首乌益智胶囊组大鼠海马Notch1、Hes3及Stat3 m RNA表达显著升高(均P<0.05)。结论:1.首乌益智胶囊对慢性脑缺血认知障碍大鼠有明显的改善记忆、学习和认知的作用。2.首乌益智胶囊通过上调VEGF、Shh,Ang-1、Tie-2、Notch4m RNA基因的表达,促进血管新生。3.首乌益智胶囊通过上调Notch1、Stat3、Hes3基因的表达,从而降低慢性缺血缺氧对神经细胞体的损伤,保护神经元功能与结构的完整,发挥神经保护作用。