对氧磷酶1（paraoxonase1，PON1）是生物体内存在的一种广谱的非专一性酯酶。它能通过催化磷酸酯键的水解，来降解有机磷酸、芳香羟基酸酯和氨基甲酸酯，从而对水解有机磷杀虫剂及降解神经毒剂发挥重要作用。近年来研究发现，PON1具有抑制低密度脂蛋白氧化的作用，与动脉粥样硬化，慢性肝损伤、冠心病及Ⅱ型糖尿病等多种疾病的发病有密切关系。　　在本研究中，我们首先利用实验室构建的含有pon1基因的重组表达质粒pET-28a-pon1，经IPTG诱导表达目的蛋白PON1。经过Ni-NTA亲和层析纯化后，获得纯化的目的蛋白，用于PON1蛋白兔多克隆抗体的制备，为后续的真核表达产物检测与纯化奠定基础。　　家蚕杆状病毒表达系统为真核表达系统，具有高效、安全性高、表达产物翻译后修饰水平高、生产成本低等优势，是外源蛋白研究的理想表达系统。本研究利用该系统表达了pon1。首先，利用构建了重组转移载体pFastBac1-pon1，经定点转座重组构建了重组杆状病毒vBm-pon1。对重组病毒进行滴度测定，然后以病毒感染的家蚕BmN细胞上清接种家蚕五龄幼虫，待出现明显发病症状后收集蚕血淋巴，用于后续的目的蛋白纯化和活性测定。利用亲和层析柱从蚕血淋巴中纯化得到PON1，并与原核表达纯化的PON1进行生物学活性比对，结果表明家蚕中表达的PON1酶活性明显高于原核表达产物。为了研究糖基化修改对PON1酶活性的影响，我们利用N型糖苷酶PNGaseF对纯化的PON1进行酶切去糖基化分析，酶切后的PON1在Westernblotting上显示比去糖基化前小1～2kD，说明PON1蛋白有N型糖苷链修饰，但去糖基化后比预期的分子量还稍大，说明还可能存在O-糖基化。我们又进一步分析了糖基化修饰对目的蛋白生物学活性的影响，结果表明当将家蚕表达的PON1去糖基化后，酶活性丧失，表明糖基修饰对于维持PON1的生物学功能至关重要。上述研究工作将为今后深入了解PON1的生物学功能提供理论依据，同时也将为实现其产业化生产奠定基础。