伪狂犬病是由伪狂犬病毒(Pseudorabies virus，PRV)引起的多动物共患病，猪是伪狂犬病毒的天然宿主。2011年底，我国多省份经gE基因缺失株Bartha-K61弱毒疫苗免疫的猪突发伪狂犬疫病，对猪场造成巨大经济损失。病毒分离等实验证明疫病爆发根源是该毒株发生变异。对感染PRV变异株和疫苗免疫的猪区别诊断，是国际上控制伪狂犬病的策略之一。为有效防控并清除猪伪狂犬病，亟需建立针对PRV变异株gE蛋白抗体的检测方法。　　本实验用原核系统表达了PRV新流行株河南博爱株的gE蛋白，建立了一系列检测gE蛋白抗体的方法。建立了间接ELISA方法，包被抗原浓度0.32μg/mL，待检血清1∶400稀释，1％牛血清白蛋白(BSA)封闭，羊抗猪IgG5000倍稀释，以5倍信噪比为阴阳性判定标准。本方法与阻断法ELISA试剂盒相比符合率为91.36％，灵敏性为76.92％，特异性为94.12％。　　为建立更快速的检测方法，基于间接ELISA实验，我们将gE蛋白与猪IgG分别作为检测线和质控线，以胶体金颗粒标记羊抗猪IgG制备免疫胶体金，组装成胶体金免疫层析试纸条。试纸条的质控线（C线）包被2mg/mL的猪IgG，检测线(T线)包被2mg/mL的gE蛋白。胶体金标羊抗猪IgG的pH9.0～9.2，浓度0.07mg/mL。敏感性实验发现，血清稀释640倍时检测线和质控线最清晰，但特异性实验发现试纸条特异性较差。　　为更快速准确地检测gE蛋白抗体，我们建立了基于磁珠的检测方法。优化反应条件后，本方法检测限达到阳性血清稀释51200倍，线性范围为血清稀释50～25600倍，灵敏度比ELISA方法有较大提高。并且，本方法可在30m in内完成gE蛋白抗体检测。　　综上所述，本实验建立了三种检测PRV gE蛋白抗体的方法:间接ELISA方法、免疫层析试纸条方法以及基于磁珠的快速检测方法。基于磁珠的快速检测具有灵敏度高、操作简便等优点，有望开发成新型PRV gE蛋白抗体快速检测商品化试剂盒。