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蒲黄,为香蒲科（Typhaceae）植物水烛香蒲 Typha angustifolia L.、东方香蒲 Typha orientalis Presl.或同属植物的干燥花粉,是一味常用中药。该药性味甘平,归肝、心包经,具有凉血止血、活血化瘀的功效。临床应用包括生品和炭品,生品偏于活血行瘀止痛,可治经闭腹痛、产后瘀阻作痛、跌仆生闷等证;炭品偏于止血,可治吐血、衄血、崩漏、尿血等多种血证。 蒲黄炮制始于宋代,清代后炒炭开始盛行。传统炮制理论认为蒲黄炒炭后止血作用增强。因此,在继承传统经验的基础上,运用现代化学分离分析方法、结合药理活性考察,对蒲黄炭进行深入的研究与开发,具有相当广阔的前景。 本论文分三个部分对蒲黄炒炭后化学成分进行研究第一部分 文献综述研究 对蒲黄的本草考证、化学成分、药理作用、临床应用以及炮制概况进行综述。第二部分 蒲黄炒炭化学成分研究1 首次对蒲黄炭化学成分进行提取分离、结构鉴定,对蒲黄炭化学成分进行初步研究。 分离得到 8 个化合物,运用 1HNMR、13CNMR、IR、EI-MS 等光谱技术和化学方法鉴定了 5 个单体化合物的结构:β-谷甾醇、正二十六烷、胡萝卜苷、三十一烷醇-6、正四十七烷,以及 1 个以二十二烷酸和二十四烷酸为主的饱和脂肪酸的混合物。2 系统比较了蒲黄炭和生蒲黄化学成分,表明蒲黄炒炭后化学成分发生了比较显著的变化。 比较了蒲黄炭和生蒲黄浸出物的含量,发现蒲黄炒炭后水和醇溶性浸出物含量降低、醚溶性浸出物含量升高。可能是由于炒炭过程中极性大的化合物被分解或破坏,部分分解产物为亲脂性化合物,故水和醇溶性浸出物含量降低、醚溶性浸出物含量升高。 建立了以香蒲新苷为对照品、0.1mol/LAlCl3 显色、采用分光光度法测定蒲黄中总黄酮的方法。香蒲新苷的线性范围为:0.00620.0310mg/mL,相关系数为 0.9997（n=5）。结果表明,蒲黄炒炭后总黄酮含量明显减少,由生蒲黄中的 1.84%下降到炒炭后的 0.29%。2 蒲黄炒炭化学成分研究建立了以葡萄糖为对照品、4%苯酚-硫酸显色、采用分光光度法测定蒲黄中总多糖的方法。葡萄糖的线性范围是:0.00480.0288mg/mL,相关系数是 0.9996（n=6）。结果表明,蒲黄炒炭后总多糖含量明显减少,由生蒲黄中的 2.44%下降到炒炭后的 0.23%。采用 KMnO4滴定法测定蒲黄中鞣质的含量。发现蒲黄炒炭后鞣质含量增加,由生蒲黄中的 2.53%增加为蒲黄炭中的 3.69%。建立了蒲黄炭和生蒲黄石油醚提取物的 GC-MS 分析方法,通过MAINLIB、REPLIB 库检索,分别从中鉴定出 26 个化合物,其中有 20 个化合物相同,各有 6 个化合物不同。蒲黄炒炭后,20 个相同的化合物含量都有不同程度的变化,其中炮制后含量显著升高的有:3-甲基-2-丁烯酸-2-苯乙基酯、己二酸二甲酯、邻苯二甲酸二甲酯、邻苯二甲酸二乙酯、二苯胺、癸二酸二甲酯、邻苯二甲酸甲基乙基酯、邻苯二甲酸甲基-2-乙基己基酯、邻苯二甲酸二异辛酯等;炮制后含量显著降低的有:壬二酸二甲酯、邻苯二甲酸二异丁酯、3,5-二烯豆甾烷等。在 6 个不同的化合物中,生蒲黄有而蒲黄炭没有的化合物是:8-羟基辛酸甲酯、9-羟基壬酸甲酯、10-十八碳烯酸甲酯、间羟基肉桂酸甲酯、3-[4-（乙酰氧基）-3-甲氧基苯基]-2-丙烯酸甲酯、11-十八碳烯酸甲酯;蒲黄炭有而生蒲黄没有的化合物是:3-羟基-螺甾-8-烯-11-酮、氢化肉桂酸甲酯、2,4-二甲基己二酸、2,4-二叔丁基苯酚、十一碳二酸二甲酯、9,10-二羟基硬脂酸甲酯。蒲黄炒炭后石油醚提取物化学成分的种类和含量都有一定程度的变化,但是基本的化合物类型没有太大改变。利用 HPLC 指纹图谱对蒲黄炭与生蒲黄的甲醇提取物进行比较,发现蒲黄炭与生蒲黄的 HPLC 指纹图谱有非常明显的不同。生蒲黄指纹图谱共有23 个峰,蒲黄炭指纹图谱共有 20 个峰,两者共有峰 10 个:保留时间分别为 15.693min、16.808min、20.219min、22.907min、26.663min、29.341min、33.526min、36.711min、51.037min 和 54.111min,保留时间为 15.693min 的峰炒炭后峰面积减小外,其余各峰炒炭后峰面积均有所增加。蒲黄炭指纹图谱中除在保留时间 29.320min 处新增了一个峰高相对较大的峰外,其余各峰都相对较低。8 批生蒲黄的 12 个共有峰中,在蒲黄炭的指纹图谱中出现了 3个,保留时间分别为 15.693min、33.526min 和 36.711min,其余保留时间为7.399min、28.064min、45.403min、77.169min、88.466min、97.990min、103.578min（香蒲新苷）、119.821min 和 125.937min（异鼠李素-3-O-新橙皮糖苷）的 9 个峰在蒲黄炭指纹图谱中均消失。建立了生蒲黄药材 HPLC 指纹图谱,测定了 8 批生蒲黄药材 HPLC 指纹图谱,确立了生蒲黄药材指纹图谱中 12 个共有峰,并以香蒲新苷峰为参照峰,通过中药指纹图谱相似度计算软件生成对照图谱,计算 8 批生蒲黄药材 HPLC 指纹图谱与对照图谱的相似度在 0.9150.996 之间。所建立的 HPLC指纹图谱有很好的精密度、重现性和稳定性,适用于生蒲黄药材的质量控制 。3 蒲黄炒炭后化学成分变化机理的初步研究