苯丙氨酸生物合成的5个关键酶基因的串联表达

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该研究工作从大肠杆菌K12诱变菌株基因组中用PCR方法扩增得到了ppsA和pckA基因,并人工合成了黄色短杆菌P<,BF>启动子.在已经构建的含有aroG、pheA和tyrB基因的穿梭质粒pJN3的基础上,将ppsA、pckA基因和P<,BF>启动子以P<,BF>-ppsA-pckA的顺序克隆到质粒pJN3上,构建成5串联基因穿梭质粒pJN5,然后用电转化方法导入黄色短杆菌中进行酶活性检测和产酸发酵研究.结果表明,ppsA和pckA基因的串联表达有利于苯丙氨酸生物合成途径下游产物的生成.转化了pJN5质粒的菌株,其苯丙氨酸产量提高到了出发菌株的3.4倍,比携带pJN3质粒的菌株提高了13﹪.
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