深黄被孢霉△<'6>-脂肪酸脱氢酶基因的筛选及其在大肠杆菌中的表达

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ν-亚麻酸作为膜脂的重要成分,同时又是机体代谢中花生四烯酸和前列腺素合成的前体,是一种具有重要生理功能的不饱和脂肪酸.△<6>-脂肪酸脱氢酶是催化亚油酸脱氢形成ν-亚麻酸的限速酶,因此△<6>-脂肪酸脱氢酶基因的研究具有重大的理论和实际意义.论文研究了利用放射性同位素标记的特异核苷酸探针,筛选深黄被孢霉cDNA文库以获得△<6>-脂肪酸脱氢酶的全长基因,以及△<6>-脂肪酸脱氢酶结构基因在大肠杆菌JM109中的表达.通过Southern杂交,确证了本室克隆的高山被孢霉和深黄被孢霉△<6>-脂肪酸脱氢酶基因的正确性,建立了一套完整的从cDNA文库中筛选△<6>-脂肪酸脱氢酶基因的策略和方法;并初步表明,利用原核表达载体pBV220构建重组质粒,△<6>-脂肪酸脱氢酶基因能够在原核宿主E.coli中获得表达.
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