家蚕翅原基细胞凋亡和细胞自噬的分析

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程序性细胞死亡(Programmed cell death)主要包括Ⅰ型程序性细胞死亡(PCDⅠ)和Ⅱ型程序性细胞死亡(PCDⅡ)。PCDⅠ和PCDⅡ又分别被称作细胞凋亡和细胞自噬。PCD是当今生物学研究的一个热点领域。昆虫作为PCD研究的材料具有其它物种不具有的优势。果蝇和家蚕等全变态昆虫的唾液腺、中肠、脂肪体及丝腺等组织,在变态发育过程中发生显著的程序性细胞死亡,它们是研究PCD的理想的材料。目前,对这些组织的PCD研究较多。在家蚕的变态发育过程中,翅原基发育一直被认为以分化发育为主,关于家蚕翅原基的PCD研究较少。本研究从基因表达、蛋白表达和细胞形态学等水平对家蚕幼虫至蛹期翅原基的PCD发生情况进行了研究。  为了研究细胞凋亡在家蚕翅原基的发生情况,检查了凋亡细胞特有的DNA断裂的发生情况,细胞凋亡相关基因在mRNA水平的表达情况,caspase3的酶活水平等。结果表明,家蚕翅原基在W1期部分细胞可能发生了细胞凋亡。  为了研究细胞自噬在家蚕翅原基的发生情况,检查了细胞自噬相关基因在mRNA水平的表达情况,酸性磷酸酶的酶活性水平,自噬溶酶复合体的发生及关键蛋白Atg8的表达情况等。结果表明,翅原基部分细胞可能发生细胞自噬的现象。  为了研究家蚕翅原基细胞凋亡和自噬相关基因的表达是否受昆虫激素的诱导调控,我们分析了家蚕翅原基细胞凋亡和自噬相关基因的表达与家蚕体内激素水平之间的关系,并分析了蜕皮激素和保幼激素对家蚕翅原基细胞凋亡和自噬相关基因的诱导表达。结果表明,在家蚕翅原基组织中,激素对细胞凋亡和自噬相关基因的表达没有明显的诱导作用。
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