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目的:
通过综合运用代谢组学研究方法研究关节1号方对兔膝OA脂质代谢组学变化模式的干预结果,初步建立骨关节炎诊断和病情活动的代谢组生化变动的评价模型。继而初步分析探索中药复方治疗OA的疗效物质基础及相关机制途径。为关节1号方的药效学分析提供进一步的依据。
方法:
30只家兔,随机选23只行膝骨关节炎伸直位造模。造模六周后,随机耳缘静脉注射空气处死模型组和正常组家兔各一只,取软骨做病理示造模成功。造模后模型组(造模六周后)的家兔分为关节1号方组、美洛昔康组、模型组,无造模的家兔为正常组,每组各6只。然后分别给予药物干预,灌胃一月。于造模前、造模后、药物干预后分别取血,离心后取血清。待用代谢组学GC-MS法检测。
结果:
1.造模后软骨组织病理学结果
动物造模六周后病理切片示关节面透明软骨均匀变性,有软骨碎片脱落;以垂直裂隙为特征,表面形成乳头状突起,示造模成功。
2.GC-MS检测结果
用GC-MS检测家兔血清发现有多种脂肪酸发生变化,其中肉豆蔻酸(C14:0)、棕榈酸(C16:0)、十七酸(C17:0)、亚油酸(C18:2)、油酸(C18:1)、花生四烯酸(C20:4)、花生酸(C20:0)均有变化。造模前各组家兔血清脂肪酸的差异无统计学意义(P>0.05)。造模六周后,模型组的家兔与正常组的家兔相比,亚油酸、花生四烯酸、油酸的差异具有统计学意义(P<0.05),其中油酸降低,亚油酸、花生四烯酸升高。药物干预后,与正常组的血清脂肪酸相比,中药组、西药组、模型组亚油酸均有不同程度升高,但中药组与正常组的差异不具有统计学意义(P>0.05),而西药组、模型组与正常组的差异具有统计学意义(P<0.05);与正常组的血清脂肪酸相比,中药组、西药组、模型组中花生四烯酸均有不同程度升高,其差异具有统计学意义(P<0.05),但中药组、西药组比模型组降低。
3.模式识别结果
在判别分析中,造模前、造模后都建立了比较满意的判别函数;主成分分析造模前、后有三个主成分,造模前和造模后在主成分构成图的空间分布中的分布位置不同,两组间可得到较明确的区分。
结论:
本实验比较成功的制作了骨关节炎模型;发现了骨关节炎和非骨关节炎在外周血脂肪酸中存在很大变化;经研究发现补益肝肾、利水消肿的关节1号方在治疗骨关节炎时,可能通过亚油酸、花生四烯酸起到抑制炎症和改善微循环的作用。