宁夏青霉属(Penicillium Link)分类及马铃薯黑痣病生防青霉筛选

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青霉属是自然界中一种常见的真菌,与人类的生产生活关系密切,常引起植物病害,也是一种植物病害潜在的生防菌。自Link 1809年首次发现青霉至今已报道的青霉属有250多种,我国目前报道的近110多种,宁夏青霉属的分类研究还处于空白。搞清宁夏青霉属种类和分布,筛选其具有生防作用的种类,对于丰富青霉属多样性、发掘马铃薯黑痣病生防菌新资源和促进植物病害的防治具有重要意义。本研究以县级为单位,对宁夏回族自治区境内22个县(区、市)的93个乡镇的青霉属进行了系统调查,共采集土壤标本449份,病害标本63份,对其进行分离纯化。用传统分类学鉴定方法并结合ITS1-5.8S-ITS2 rRNA基因、BenA基因蛋白片段扩增测序进行菌种分类鉴定。从中选取30种青霉属分别与马铃薯黑痣病病菌做对峙培养实验,筛选防效较好的生防青霉。试验取得如下结果。1、共分离筛选出青霉属菌株457株,共鉴定出青霉59种,其中国内已知种49种,宁夏新纪录46种,中国新记录种2种,新种1个,未定名种7个。并对所有种的菌落形态和显微形态进行描述,并附有相应照片。2、新种为宁夏青霉Penicillium ningxiaensis.中国新记录种为Penicillium pasqualense、 Penicillium polonicum。3、研制出一种新的用于分离青霉属的培养基——酵母膏葡萄糖琼脂培养基(YDA),其分离效果是常用查氏酵母膏培养基的2.5倍。4、筛选出1株对马铃薯黑痣病菌拮抗效果最为稳定的拮抗青霉P19,其抑菌率可达到58.5%,通过抑菌机理研究,发现菌丝壁出现弯曲和畸形,原生质体凝结和溶解,菌丝被溶解等现象,可能是P19菌株所含有的抗菌物质破坏了立枯丝核菌的细胞壁,进而溶解了菌丝内的原生质体,使立枯丝核菌的生长受到限制。5、通过对P19菌株发酵液稳定性测定,发现其具有相对稳定的热稳定性和酸碱稳定性,其发酵液在温度20℃处理10min和PH=3处理2h时,抑菌效果达到最好,对中性条件和高温不具有耐受力,具有可开发成生防制剂的潜能。
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