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目的:本实验将人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株HCC827进行传代培养、CCK8药敏试验、利用流式细胞法测定其凋亡及细胞周期,检测华蟾素联合吉西他滨对HCC827细胞的抑制率及对其细胞周期的影响,探讨华蟾素在人NSCLC个体化治疗中的意义,期望为华蟾素作为治疗人非小细胞肺癌的辅助药物提供新的理论依据。方法:实验组先利用HCC827细胞株进行体外培养,然后利用CCK8药敏试验以及流式细胞法测定其细胞周期,从而检测华蟾素联合吉西他滨对HCC827细胞的抑制率及对其细胞周期的影响。对照组利用人HCC827细胞株进行体外培养,然后利用CCK8药敏试验以及流式细胞法测定细胞周期,以此检测吉西他滨对HCC827细胞的抑制率及对其细胞周期的影响。对照组利用HCC827细胞株进行体外培养,然后利用CCK8药敏试验以及流式细胞法测定细胞周期,以此检测华蟾素对HCC827细胞的抑制率及对其细胞周期的影响。结果:1、单用吉西他滨对HCC827细胞的抑制率及细胞周期的影响:1.1吉西他滨处理24小时,在0.0025-0.04 u M的浓度范围内可以造成10%左右的细胞生存率的降低,0.08-0.32 u M浓度范围内可以造成约20%左右细胞生存率降低,这说明在一定程度上,吉西他滨对HCC827细胞具有杀伤及促进细胞死亡的作用,并且随着其浓度的增加,其杀伤及促进细胞死亡的作用就越明显,抑制率就越高,细胞的存活率也就越低,从而达到的抗肿瘤效果也越好;1.2使用吉西他滨单独处理,尽管可以在一定程度上促进细胞的DNA合成及有丝分裂(即在细胞增殖上具有促进作用),但它最终会使总体细胞数量减少,因为在促进增值的同时,它也会诱导大量的细胞凋亡。2.单用华蟾素对HCC827细胞的抑制率及细胞周期的影响:2.1华蟾素对HCC827细胞活力具有抑制作用,并且这种抑制作用呈现出一定的剂量依赖性。显微镜下观察到华蟾素处理能呈剂量依赖性地减少细胞数量,但最终死亡细胞并无明显的增多;2.2华蟾素单独处理能促进细胞进入DNA合成期(S期),但最终细胞却不能完全发生有丝分裂,因为细胞分裂在G2/M期被阻滞,同时与对照组相对比无明显细胞凋亡,因此总的效应为细胞数量的减少。3、吉西他滨联合不同稀释倍数的华蟾素对HCC827细胞的抑制率及细胞周期的影响:3.1吉西他滨(0.04 u M)和华蟾素(20、40、80、160倍稀释)药物单用均可以降低HCC827细胞活力,而华蟾素联合吉西他滨可以进一步降低HCC827细胞活力,提高细胞生存抑制率;3.2华蟾素联合吉西他滨对细胞周期的影响比较复杂,联合处理能够对细胞进入DNA合成期(S期)进行抑制,但最终对细胞的有丝分裂(G2/M期)并不影响。但是,药物联合处理仍然较为强烈地促进了细胞凋亡,总体效应表现为细胞数量减少及细胞生长状态的抑制。结论:1、中药制剂华蟾素联合西药吉西他滨治疗人NSCLC可以进一步降低HCC827细胞活力,提高细胞生存抑制率。2、中药制剂华蟾素联合西药吉西他滨治疗人NSCLC对其细胞周期总体效应表现为细胞数量减少及细胞生长状态的抑制。3、此为华蟾素作为治疗非小细胞肺癌的辅助药物提供了理论指导及依据。