粘附分子CD146是黑色素瘤的标志分子，与黑色素瘤的发生和转移密切相关。此外，我们实验室发现CD146还是肿瘤新生血管的新靶标，其表达水平受肿瘤微环境的影响，并参与肿瘤血管生成；而抗CD146单克隆抗体AA98能够抑制血管生成和多种肿瘤的生长(Blood.2003，102∶184-91；Faculty of1000Biology.Feb.28，2007)。本研究是在上述工作的基础上探索CD146及其抗体AA98在肿瘤血管生成中的分子机制，获得主要研究结果如下：　　 (1)发现肿瘤培养上清促进血管内皮细胞增殖和迁移的分子机制是：肿瘤培养上清诱导p38 MAPK的磷酸化、激活NF kappa B信号通路，从而上调MMP-9和ICAM-1的表达，后者在内皮细胞迁移和肿瘤血管生成过程中起着非常重要的作用。另外，我们还发现抗体AA98能够抑制由肿瘤培养上清诱导的p38 MAPK磷酸化、NF kappa B核转移和MMP-9、ICAM-1的表达，这种抑制作用表现为抗体剂量依赖性和时间依赖性(Mol Cancer Ther.2006，5(11)∶2872-2878)。　　 (2)NF kappa B的激活能够上调CD146的表达，而且呈时间、剂量依赖性。通过基因序列分析，我们发现CD146启动子区域含有两个假定的NF kappa B结合位点。为了证实该启动子的转录效率及与NF kappa B结合能力，我们进行了缺失突变和染色质免疫共沉淀实验，结果证实了NF kappa B结合位点的存在，后者是调节CD146表达所必需。　　 (3)CD146在活细胞中发生二聚化，而且这种二聚化现象与肿瘤的恶化相关。此外，还发现肿瘤培养上清能够通过激活NF kappa B通路诱导CD146二聚化，而抗体AA98能够阻止其诱导的CD146二聚化，提示抗体AA98抑制肿瘤的生长和转移可能与其抑制CD146的二聚化相关(BBA-Mol Cell Res.2007，773(4)∶513-20)。　　 (4)发现A375细胞中存在100 kD和130 kD两种不同分子量的CD146。有意思的是只有130 kD的CD146分子发生酪氨酸磷酸化，暗示可能参与细胞信号传递；而100 kD的CD146分子发生二聚化，可能参与肿瘤的生长与转移。　　 (5)发现CD146和波形蛋白vimentin在黑色素瘤细胞A375中相互作用，而抗体AA98能够抑制CD146与vimentin的相互作用，其意义正在探索之中。　　 根据上述实验结果，我们推测CD146及其抗体AA98在肿瘤血管生成中可能的作用机制是：肿瘤培养上清激活NF kappa B信号通路，上调CD146潜在配体的表达；而配体和CD146的结合诱导CD146二聚化，激活p38 MAPK、促使NF kappa B发生核转移，上调促血管生成因子MMP-9、ICAM-1、CD146的表达，后者促进血管内皮细胞迁移和血管生成。单克隆抗体AA98与CD146结合，阻止了CD146与其潜在配体的相互作用，进而抑制了CD146的二聚化，阻止p38MAPK发生磷酸化，抑制NF kappa B活性，下调MMP-9和ICAM-1表达，从而抑制血管内皮细胞增殖、迁移和血管生成。