论文部分内容阅读
目的：探讨高迁移率族蛋白1(HMGB1)基因沉默对白血病细胞耐药逆转的作用。
方法：将HMGB1基因特异性干扰RNA(HMGB1 siRNA)导入K562/A02细胞中，通过Westernblot和RT-PCR法检测HMGBl基因在转染前后的差异表达；WST8法检测阿霉素(ADM)对转染前后K562/A02细胞的半数抑制浓度(IC50)；流式细胞术检测凋亡细胞百分率；Western blot检测线粒体促凋亡蛋白Smac/DIABLO的释放；采用Caspase活性定量检测试剂盒分析Caspase-3的活性。
结果：(1)与未经处理的K562/A02细胞组相比，转染HMGBl siRNA的K562/A02细胞组HMGB1 mRNA和蛋白水平分别下降86％和71％。(2)HMGB1基因沉默使K562/A02细胞对ADM的药物敏感性增强，其IC50值从转染前的(4.83±0.08)μg/ml降低到(1.33±0.10)μg/ml，并在ADM浓度为1μg/ml和5μg/ml时，细胞凋亡百分率分别增加27％、32％。(3)HMGB1基因沉默可促进ADM所致Smac/DIABLO从线粒体向胞浆释放及其Caspase-3的活性。
结论：HMGB1基因沉默能明显增加K562/A02细胞对ADM的敏感性，逆转K562/A02细胞对ADM耐药。