目的:利用双分子荧光互补BiFC技术研究p12蛋白及其新的结合蛋白NBP在活细胞内的相互作用，并通过Pull-Down和CO-IP实验验证P12，与NBP蛋白之间的相互作用结果。 方法:利用分子克隆技术构建P12c0czP，蛋白与NBP蛋白的双分子荧光互补真核表达载体后，利用双分子荧光互补技术观察p 12c0czP.蛋白及其新的结合蛋白NBP在活细胞内的相互作用。利用pGEX 4T-1质粒，分别构建GST- p 12P，与GST-UPP融合蛋白，将其分别转染至BL21缺陷表达菌中，切除GST-NBP蛋白的GST标签后行Pull-Down实验，利用SDS-PAGE技术验证p12c0czP，与NBP相互作用的存在。利用真核质粒pCDNA3.1，使用HA及FLAG蛋白表达标签，分别构建pCDNA 3.1-HA- p12P，及pCDNA 3.1-FLAG-NBP表达质粒。经测序正确后，分别转染至293T细胞中，使用免疫共沉淀(CO-IP)技术验证真核细胞中p12c0czP与UPP存在相互作用。 结果:利用BiFC技术观察p12蛋白及其新的结合蛋白NBP在活细胞内的相互作用，并对相互作用进行了亚细胞定位，同时Pull-Down和CO-IP的实验结果验证了p12c0czP，与NBP蛋白之间存在着相互作用。 结论:本项实验研究发现p12蛋白与其新的结合蛋白NBP之间存在着相互作用，这为p12cnKZnP的临床治疗及生物治疗靶点的应用提供了理论依据。