目的:构建受体内皮细胞化的组织工程同种心脏瓣膜,减轻移植后免疫排斥反应,延长瓣膜的使用寿命。 方法:采用低渗液-去污剂(1％DOA)-核酸酶法去除同种瓣膜组织中的全部细胞成分,测定去细胞前后组织学、免疫学、组织厚度、组织含水量、热皱缩温度、组织基因组DNA含量、胶原蛋白含量、应力应变曲线、破坏强度及组织伸长比变化;培养成人大隐静脉内皮细胞,以超生理密度(5×105种个/ml)种植于去细胞的同种心脏瓣膜上,静态培养1天后,间断动态培养4天,扫描电镜观察。 结果:组织学检查同种组织瓣的去细胞化完整的去除了同种心脏瓣膜、管壁组织及肌肉中所有的细胞成分,保留了完整的细胞外基质;免疫组织化学证实HLA-DR抗原表达明显下降;组织基因组DNA含量显著下降(瓣叶下降91.14％,管壁下降91.53％);与去细胞前相比,只有管壁组织的含水量(去细胞前75.44±1.84,去细胞后82.05±0.71,t=8.214,P<0.01)明显增加,组织厚度、瓣叶组织含水量、热皱缩温度、应力应变曲线、破坏强度及组织伸长比无显著差别。培养的内皮细胞种植5天后,去细胞同种组织瓣膜的表面基本覆盖单层内皮细胞,细胞相互延伸汇合,形态结构良好。 结论:低渗液-去污剂(1％DOA)-核酸酶去细胞法方便有效,去细胞同种心脏瓣膜的生物学及生物力学特性稳定,免疫性显著下降,符合机体的要求;去细胞同种心脏瓣膜的再内皮细胞化保留了同种心脏瓣膜的正常的结构和功能,有望延长瓣膜的使用寿命,取得更好的临床疗效。